内容正文:
命题板块十:生物技术与工程
“莫敬餐74
基因工程的工具
—两类酶和载体
题点考法—全练过
关键能力一一点通
1,限制酶能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并使特定部:1,建构基因工程基本工具的知识体系
位的磷酸二酯键断开。修饰酶能对DNA或RNA的碱基进】
“分子于术刀”:限制性
行修饰,防止DNA或RNA被限制醇破坏。某些噬菌体能寄:
内切核酸痾
DNA
作用
磷酸
生在特定大肠杆菌体内进行繁殖。下列叙述正确的是():
重组
年住
“分子缝合针":DNA
二酯锭
A.不能被噬菌体侵染的大肠杆菌,细胞膜上可能没有噬菌:
技术
连接酶
载体:质粒、
体可识别的特异性受体
的基
磁菌体、动
本工
“分子运输车”:基因进
植物病幸等
B能被噬菌体侵染的大肠杆菌,体内无核糖体,不能合成破
具
人受体细胞的被体
坏外源DNA的限制酶
作为载体的
条件
C.能寄生于大肠杆菌的噬菌体,DNA上一定没有大肠杆菌
限制酶的识别位点
D,能寄生于大肠杆菌的噬菌体,DNA上不可能存在与大肠
杆菌相同的修饰物
2.如图是4种限制酶的识别序列及其酶切位点,下列叙述错误的
是
GAATTC
AT
aGGccc
CTTAAG
TTAA
COCGGG
TTAAA
酶1
酶2
酶3
陈4
A.不同类型限制酶切割后,有的产生黏性末端,有的产生平末端
B.不同类型的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端
C.用酶1和酶2分别切制目的基因和质粒,连接形成重组:
DNA分子后,重组DNA分子不能被酶2识别
D.用酶3和酶4切割目的基因和质粒后,其产物经T4
DNA连接酶催化能连接形成重组DNA分子
2,归纳比较与DNA有关的几种酶
3.限制酶I和限制酶Ⅱ的识别序列和切割位点分别是
一G¥GATCC一和一¥GATC一,利用如图所示的质粒构
:
作用部位
作用结果
建基因表达线体,仅考虑图中识别序列。下列叙述错误
DNA分子中的磷将DNA切成两个
限制酶
的是
酸二酯键
或多个片段
gAcS慕4
DNA
DNA分子片段间
GGATCO
将两个DNA片段连
〉CCTAGG
CUTAGG
A
连接酶的磷酸二酯键
接为一个DNA分子
质粒
(
Cenr I
以DNA单链为模
DNA脱氢核苷酸间的
注,CeeI和CceI表示向种标记基因
板,将单个脱氧核
口女示限制性内切核酸蕊仪有的识别序列放大
聚合酶磷酸二酯键
苷酸依次连接到单
A.用限制酶I和限制酶Ⅱ切割DNA后获得的黏性末端
链末端
相同
将双链DNA分子
B.若用限制酶Ⅱ切割质粒,完全切割时可得到两种DNA:
解旋酶
DNA分子碱基对
局部解旋为单链,
中的氢键
片段
形成两条长链
C.若用限制酶【切割目的基因,则有两个磷酸二酯键会被
DNA
DNA分子中的磷
将DNA片段水解
水解
水解酶酸二酯键
为单个脱氧核苷酸
D.构建基因表达载体时,应用限制酶Ⅱ切制质粒,用限制酶
I切割目的基因
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新高考方案“微”积分生物学
4.如图表示不同的限制酶在目的基因的提取和基因表达载体!3.掌握限制酶的3类选择技巧
的构建中的作用,下列有关叙述错误的是
(
第一类:根据日的基因两端的限制酶切点确
酵3
定限制酶的种类。
酶1
2
Ps I Sma I
PssI
IDNA分子
日的基
Sma1抗病基因
图1
图2
A.限制酶沿识别序列的中轴线两侧将DNA两条链切开
(1)应选择切点位于目的基因两端的限制酶,如
B.在图1和图2中将分别产生4个和2个黏性末端
图甲可选择P对I
C,限制酶切割的是特定核苷酸序列之间的磷酸二酯键和氢键
(2)不能选择切点位于目的基因内部的限制酶,
如图甲不能选择SmaI。
D.图示中酶1、酶2和酶3可以为不同种类的限制酶
(3)为避免目的基因和质粒的自身环化和随意
5.现有一长度为1000个碱基对(bp)的DNA分子,用限制性内:
连接,也可使用不同的限制酶切割目的基因和
切核酸酵EcoRIi酶切后得到的DNA分子仍是1OO0bp,用
质粒,如图甲也可选择用PL和EcoR I两种
Kpnl单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子,
限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切
用EoRL、Kpm同时酶切后得到2o0bp和600bp两种长度的
点,如图乙)。
DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是
EcoRI
EcoRI
1200200
第二类:根据质粒的特点确定限制酶的种类
B
(如图)。
coRT
coRT
其会破坏标记其切点不在启动子与
200
200
200
基因,不宜选择终止子之间,不宜选择
-Kon I
Xho
其会破坏
hnlⅢ
启动了,
0
600
不宜选择
D
自动门
Nde I
抗生茶
Xba I
其位于启
6.目前基因工程所用的质
EcoRI
抗性基因
Baml山I
动