2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体-【大鹏生物】高中新教材精品课生物选择性必修3 生物技术与工程 课件

第2节 动物细胞工程 第2课时　动物细胞融合技术与单克隆抗体 第二章 细胞工程 [学习目标] 1.阐明动物细胞融合技术的概念，举例说出诱导动物细胞融合的方法。 2.概述单克隆抗体的制备过程。 2 [本讲目录] 一、动物细胞融合技术 二、单克隆抗体及其应用 3 一、动物细胞融合技术 [教材梳理] 1.概念：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 2.原理：细胞膜的流动性。 3.诱导融合的方法 PEG融合法 电融合法 灭活病毒诱导法 4.意义：细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。 5.应用 (1)成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。 (2)用于制造单克隆抗体。 4 [核心探讨] 探讨点　动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较 1.19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中，观察到多核细胞。如何解释这一现象？ 提示　病人体内的病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。 2.比较动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术 (1)动物细胞融合和植物体细胞杂交技术的原理分别是什么？ 提示　动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性； 植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 (2)两者在方法上有什么异同？ 提示　都可用聚乙二醇(PEG)融合法和电融合法诱导融合；但动物细胞还可用灭活病毒诱导法诱导细胞融合。 (3)两者在最终结果上有什么不同？ 提示　动物细胞融合最终得到的是杂交细胞，而植物体细胞杂交技术最终得到的是杂种植株。 6 [核心归纳] 动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较 比较 项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性 步骤 酶解法去掉细胞壁后，诱导原生质体融合，形成杂种细胞，再经植物组织培养形成杂种植株 分散成单个细胞后诱导细胞融合，形成杂交细胞 方法 聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2＋—高pH融合法、电融合法、离心法 PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法 结果 形成杂种植株 形成杂交细胞，以生产细胞产品 意义 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 突破有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 7 题组一　动物细胞融合技术 1.与植物体细胞杂交相比，动物细胞融合的原理及其特有的诱导方法分别是( ) A.细胞膜的流动性、离心 B.细胞膜的流动性、灭活病毒诱导法 C.细胞的全能性、电融合法 D.细胞的全能性、灭活病毒诱导法 B 2.基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞( ) A.AAaa B.AaBb C.Aabb D.BBbb C 3.下列关于动物细胞融合与植物体细胞杂交技术的说法正确的是( ) A.基本原理相同 B.诱导细胞融合的方法相同 C.细胞融合前的处理过程相同 D.融合后都需要进行筛选 D 二、单克隆抗体及其应用 [教材梳理] 1.传统抗体的获得 (1)方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。 (2)缺陷：产量低、纯度低、特异性差。 11 2.单克隆抗体的制备 (1)制备原理 ①B淋巴细胞特点：一种B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，B淋巴细胞在体外不能无限增殖。 ②骨髓瘤细胞特点：能大量增殖。 ③杂交瘤细胞特点：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞，既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体。 12 (2)制备过程 B淋 能 分泌所需 杂交瘤 交细胞 巴细胞 杂 3.单克隆抗体的优点 (1)能准确地识别抗原的细微差异。 (2)与特定抗原发生特异性结合。 (3)可以大量制备。 4.单克隆抗体的应用 (1)作为诊断试剂，如定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。 (2)运载药物，如ADC(抗体偶联药物)，是由单克隆抗体和小分子药物偶联而形成。这种药物具有特异性高、安全性较好的特点，可以有效地杀伤肿瘤细胞，临床用于治疗肿瘤疾病。 (3)治疗疾病。 [核心探讨] 探讨点　单克隆抗体的制备 根据单克隆抗体的制备过程，回答以下问题。 1.给小鼠注射特定抗原的目的是什么？ 提示　目的是能从该小鼠的脾中得到可以产生特定抗体的B淋巴细胞。 2.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经诱导融合后，培养基中共出现几种细胞？ 其中融合的细胞有几种？(如融合的话，只考虑两两融合) 提示　共有5种细胞；其中融合的细胞有3种。 3.单克隆抗体制备过程中，第一次筛选的目的是什么？方法是什么？ 提示　目的是筛选出杂交瘤细胞；方法是用选择培养基进行筛选。 4.资料： (1)细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。 (2)免疫的B淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但它不能分裂增殖，