1.2.1 微生物的基本培养技术-【大鹏生物】高中新教材精品课生物选择性必修3 生物技术与工程 课件

第2节 微生物的培养技术及应用 第1课时　微生物的基本培养技术 第一章 发酵工程 [学习目标] 1.概述培养基的成分和配制方法。 2.区分消毒和灭菌，掌握不同物品的灭菌方法。 3.概述微生物纯培养的基本操作要求。 2 [本节目录] 一、培养基的配制 二、无菌技术 三、微生物的纯培养 3 一、培养基的配制 [教材梳理] 1.培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其 生长繁殖的营养基质。 2.作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 3.培养基种类 液体培养基 ↓ 加入凝固剂(如琼脂) 固体培养基 4 4.培养基的营养构成 (1)主要营养物质：水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。 (2)某种常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成 组分 含量 提供的主要营养 牛肉膏 5 g 碳源、磷酸盐和维生素等 蛋白胨 10 g 氮源和维生素等 NaCl 5 g 无机盐 H2O 定容至1 000 mL 水 (3)还需满足微生物对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如：在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。 [核心探讨] 探讨点　概述培养基的种类和营养构成 资料一：配制培养酵母菌的培养基： 称取去皮的马铃薯200 g，切成小块，加水1 000 mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20 g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15～20 g琼脂，用蒸馏水定容至1 000 mL。 资料二：100 g马铃薯中含有80 g水、2 g蛋白质、16 g碳水化合物，还有维生素、无机盐等。 结合提供的资料和教材中的“表1－1　1 000 mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成”，分析并回答下列问题： 1.按物理性质划分上述两种培养微生物的培养基的种类。 提示　由于琼脂是凝固剂，所以培养酵母菌的培养基是固体培养基，而牛肉膏蛋白胨培养基未加凝固剂，是液体培养基。 2.分析上述两种培养微生物的培养基的营养构成。 提示　都含有水、碳源、氮源、无机盐和维生素等，其中培养酵母菌的培养基中主要由糖类提供碳源，蛋白质提供氮源，牛肉膏蛋白胨培养基中主要由牛肉膏提供碳源，主要由蛋白胨提供氮源。 3.为什么培养基需要氮源？ 提示　培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。 4.下表是某微生物培养基的成分，请分析该培养基可用来培养哪种微生物？若除去①，此培养基可用来培养圆褐固氮菌吗？ 编号 ① ② ③ ④ ⑤ 成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O 含量/g 0.4 4.0 0.5 0.5 100 mL 提示　此培养基可用来培养自养型微生物。圆褐固氮菌虽可以固氮，但其同化作用类型为异养型，培养基中必须提供含碳有机物，所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌。 [核心归纳] 1.培养基的成分及功能 营养要素 来源 功能 碳源 无机 碳源 CO2、CO32-　、HCO3- 等含碳无机物 ①构成细胞物质和一些代谢产物； ②有机碳既是碳源又是能源 有机 碳源 糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等 氮源 无机 氮源 铵盐、硝酸盐等 将无机氮合成含氮的代谢产物 有机 氮源 牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等 合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物 水 外界摄入 ①良好的溶剂；②维持生物大分子结构的稳定 无机盐 无机物 ①提供无机营养；②调节pH；③维持渗透压 11 2.几种微生物的营养和能量来源 微生物 碳源 氮源 能源 蓝细菌 CO2 光能 硝化细菌 CO2 NH3 NH3的氧化 根瘤菌 糖类等有机物 N2 有机物 大肠杆菌 糖类、蛋白质等有机物 蛋白质等 有机物 12 3.培养基的类型 标准 培养基种类 培养基特点 作用 物理 性质 固体培养基 加凝固剂，如琼脂 微生物的分离与鉴定，活菌计数，保藏菌种 半固体培养基 容器放倒不致流出，剧烈震动则破散 观察微生物的运动、分类鉴定 液体培养基 不加凝固剂 常用于工业生产 功能 选择培养基 根据某种微生物的特殊营养要求配制 选择分离 鉴别培养基 加入能与目的菌的代谢产物发生显色反应的指示剂 鉴定 来源 天然培养基 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 合成培养基 用已知的化学物质配制 分类鉴定 13 题组一　培养基的配制 1.下列关于微生物营养物质的描述，正确的是（ ） A.所有碳源都能为微生物生长提供能源 B.蛋白胨主要提供氮源和维生素 C.硝酸钾只能为微生物生长提供无机盐 D.营养物质越多，微生物生长繁殖越快 B 2.下列关于微