内容正文:
《DNA是主要遗传物质》的经典 实验解读及实例分析
一、 DNA是遗传物质的实验解读
1、格里菲思的肺炎双球菌的体内转化实验(过程图解)
(1)肺炎双球菌的类型及特点:S型,有荚膜,菌落表面光滑,有毒(会降低小鼠免疫力);R型,无荚膜,菌落表面粗糙,无毒(容易被机体的免疫系统清除),所以可以根据菌落的形态特点来判断是否发生了转化。
(2)加热杀死的S型细菌与活的R型细菌混合注射到小白鼠体内,小白鼠体内发生了转化,两种细菌的数量变化如右图。
① <m></m> 段 <m></m> 型细菌数量减少的原因是小鼠体内形成大量的抗 <m></m> 型细菌的抗体,致使 <m></m> 型细菌数量减少。
② <m></m> 段 <m></m> 型细菌数量增多的原因是 <m></m> 点之前,已有少量 <m></m> 型细菌转化为 <m></m> 型细菌, <m></m> 型细菌能降低小鼠的免疫力,造成 <m></m> 型细菌大量繁殖。
③后期出现的大量 <m></m> 型细菌是由 <m></m> 型细菌转化成的 <m></m> 型细菌繁殖而来的。
(3)实验结论:已经加热致死的S型细菌,含有某种促使R型活细菌转化为s型活细菌的活性物质。
2、艾弗里的体外转化实验(过程图解)
(1)设计思路:设法把DNA与蛋白质、多糖等物质分开,单独地直接去观察它们的作用。
(2)巧妙之处:遵循单一变量原则和对照原则。其巧妙之处在于运用“减法原理”,人为去除某个影响因素后,观察实验结果的变化。
(3)R型细菌转化为S型细菌的三个知识点:转化对象—活的R型细菌、转化因子—S型细菌DNA、转化实质—基因重组。
(4)实验结论:DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。
上清液放射性很高,
沉淀物放射性很低。
对比实验
或
相互对照
35S标记的噬菌体
(蛋白质)
子代噬菌体中无35S
上清液放射性很低,
沉淀物放射性很高。
分别用35S或32P标记噬菌体
用被标记的噬菌体侵染未被标记的细菌
搅拌、离心、检测上清液和沉淀物中的放射性物质
细菌裂解后检测子代噬菌体的放射性
32P标记的噬菌体
(DNA)
3、T2噬菌体侵染大肠杆菌的实验(过程图解)
(1)设计思路:设法把DNA与蛋白质分开,单独地直接去观察它们的作用
(2)搅拌的目的:使吸附在细菌上的噬菌体与细菌分离;离心的目的:让上清液中析出重量较轻的噬菌体颗粒。
(3)35S标记噬菌体、32P标记噬菌体制备过程:先分别在含有35S、32P的培养基上培养大肠杆菌,再用上述大肠杆菌培养T2噬菌体,即可得到DNA含有32P标记或蛋白质含有35S标记的噬菌体。
(4)实验过程及结果分析(正常结果和异常结果)
①用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌,上清液中含大量放射性的原因:保温时间过短,有一部分噬菌体还没有侵染到大肠杆菌细胞内,经离心后分布于上清液中,上清液中出现大量放射性;保温棉时间过长,噬菌体在大肠杆菌内增殖后子代释放出来,经离心后分布于上清液,也会使上清液中出现大量放射性。
②用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌,沉淀物中有大量放射性的原因:由于搅拌不充分,有少量含35S的噬菌体蛋白质外壳吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中。
由左图可知,保温时间是否过长可以以被侵染的大肠杆菌作为参照,若被侵染的大肠杆菌为100%,说明保温时间适宜,否则保温时间过长被侵染的大肠杆菌会裂解;搅拌时间超过两分钟,细胞外(即上清液)35S放射性达到最高,且搅拌时间不会影响32P的分布。
(5)实验结论:
①证明DNA是遗传物质,但不能证明蛋白质不是遗传物质
②说明DNA能控制蛋白质的合成
③说明DNA能自我复制
肺炎双球菌
体内转化实验 肺炎双球菌
体外转化实验 噬菌体侵
染细菌实验
实验者
思路
分离方式
结论以及各实验的关系
设法将DNA与蛋白质等分开,单独地研究它们遗传功能。
①证明DNA是遗传物质,而蛋白质不是遗传物质
②说明了遗传物质可发生可遗传的变异
直接分离:
分别加入到R型菌中
同位素标记法:
标记DNA和蛋白质
①证明DNA是遗传物质,但不能证明蛋白质不是遗传物质
②说明DNA能控制蛋白质的合成
③说明DNA能自我复制
格里菲思
艾弗里
赫尔希和蔡斯
加热杀死的S型菌体内有“转化因子”,是体外转化实验的基础。
4、三个经典实验对比
例析1:某研究人员模拟赫尔希和蔡斯关于噬菌体侵入细菌实验,进行了以下4个实验:①用未标记的噬菌体侵染35S标记的细菌 ②用 32P标记的噬菌体侵染未标记的细菌③用未标记的噬菌体侵染3H标记的细菌 ④用15N标记的噬菌体侵染未标记的细菌以上4个实验,经过一段时间后离心,检测到放射性主要部位是( )
A.沉淀、沉淀、沉淀和上清液、沉淀和上清液
B.沉淀、上清液、沉