1.2微生物的培养技术及应用课件-2022-2023学年高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

第2节 微生物的培养技术及应用 01 微生物的基本培养技术 WEISHENGWUDEJIBENPEIYANGJISHU 1 本节聚焦 1.什么是培养基？如何配置？ 2.什么是无菌技术？ 3.怎样进行酵母菌的纯培养？ （一）微生物 难以用肉眼观察的微小生物的统称。 1.概念： 2.微生物的类群 （1）无细胞结构 （2）原核细胞 （3）真核细胞 病毒：SARS病毒、新冠病毒等RAN病毒；噬菌体等DNA病毒 细菌：蓝细菌、大肠杆菌、乳酸菌等； 放线菌：链霉菌等 真菌：酵母菌、毛霉等； 原生生物：草履虫、变形虫等 3.微生物的结构 （一）微生物 直径在30～200nm之间 直径在0.5～5μm之间 直径3～6μm之间 ～ ～ ~ 支原体没有细胞壁 微生物结构简单、形体微小，眼睛看不到，若想看某种纯净的微生物。我们该怎么做？若想通过肉眼能看到细菌，我们又该如何？ 必须对其进行分离纯化； 对微生物进行大量培养，致使其在琼脂固体培养基表面或内部形成菌落。不同的细菌具有不同的菌落。 分散的微生物在适宜的琼脂固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的菌落。 沙门氏菌 毛霉 （一）微生物 2.实验室培养微生物条件 （1）提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件。 ——培养基 （2）确保其它微生物无法混入。 ——无菌技术 （二）培养基的配制 1.培养基概念 2.作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 1. 培养基的概念 培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 固体 培养基 液体 培养基 有无琼脂 长有酵母菌菌落 盛有液体培养基 分离、计数、鉴定等 扩大培养、用于工业生产 （二）培养基的配制 3.基本成分： 水、碳源、氮源和无机盐 ① 碳源 无机碳源： CO2、CO32-、HCO3-等 有机碳源： 葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ② 氮源 无机氮源： NH4＋、NO3-、NH3 、N2等 有机氮源： 牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等 注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源 ③ 无机盐 Ca、K 、Mg等为大量元素 Zn、Cu、Mn、Co、Mo等为微量元素 *一般情况下，不添加氮源培养基可用来培养_____微生物 固氮 补充说明： ① 含有C、H、O、N的有机物可作为异养型微生物的碳源、氮源、能源。 ② 自养型微生物与异养型微生物培养基的主要差别在于碳源。 ③ 自养型微生物所需的碳源来自无机碳源，异养型微生物所需的碳源来自有机碳源，因此可以根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。 ④ 无机氮源不但能给自养型微生物提供氮源，也能作为能源物质，如NH3既作为硝化细菌的氮源，也作为能源（NH3氧化释放的化学能）。 ⑤ 无机盐除了可以调节酸碱平衡、维持一定的渗透压之外，有些无机盐离子可以作为化能合成菌的能源（如铁细菌）。 培养基配制的原则： 1.目的要明确：不同的微生物需求不同，根据培养目的进行配制。 2.营养要协调：营养物质的浓度和比例要适适宜。 3.pH要适宜：为维持pH的相对恒定，可在培养基中加入缓冲剂，常用K2HPO4或KH2PO4。 （二）培养基的配制 4.培养基的营养构成 表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成 组分 含量 提供的主要营养 牛肉膏 5 g 碳源、磷酸盐和维生素等 蛋白胨 10 g 氮源和维生素等 NaCl 5 g 无机盐 H2O 定容至1000ml 水 牛肉膏和蛋白胨来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。 特殊营养物质： 维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等 （牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有） P10: 牛肉膏蛋白胨培养基的配制 （二）培养基的配制 5.培养基的特殊需求 在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对___、____________以及___的需求； pH 特殊营养物质 O2 微生物例子 培养基需要的特殊物质或条件 乳酸杆菌 霉菌 细菌 厌氧微生物 添加维生素 调至酸性 调至中性或弱碱性 提供无氧的条件 硝化细菌是化能自养菌，通过NH4+→NO2-→NO3-的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量，在水产养殖中具有重要作用。如图是分离硝化细菌的培养基配方,下列说法错误的是（ ） A(NH4)2SO4可作为硝化细菌的氮源和能源 B.培养基中的Na2CO3,是硝化细菌的主要碳源 C.K2HPO4和 NaH2PO4能维持培养基的pH D.硝化细菌能清除水体中的铵态氮及亚硝态氮 B CO2 现学现用： 下列四种生物的能源、碳源、氮源和代谢类型的