3.2基因工程的基本操作程序（第2课时）课件 2022—2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

基因工程的基本操作程序（第二课时） 年 级：高 二 学 科：生物（人教版） 主讲人： 学 校： 微课课件 页面统一为16:9宽幅画面比例尺寸；PPT统一格式为PPT或PPTX。 中文： 1. 课名：微软雅黑48号字； 2.（第一课时）：微软雅黑32号字； 3.学校名称：请填写全称； 4.学科、年级、主讲人、学校：华文楷体28号字（具体根据文字量可适当调整）。 英文 1.课名：字体以Times New Roman为主，字号一般使用32—36号，特别强调可以用40号； 2.（Period 1）：字体使用Arial，字号为28； 3.正文一般用24—28号，特别强调可用32号。 注意标点的规范（例如：中文省略号为……，可用Shift+数字键6打出中文省略号，英文省略号为…） 1 微课课件 温故知新 苏云金杆菌 提取 Bt抗虫蛋白基因 与载体拼接 重组DNA分子 普通棉花 （无抗虫特性） 棉花细胞 （含Bt基因） 转基因棉花 （有抗虫特性） 导入 1.目的基因的筛选与获取 2.基因表达载体的构建 3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与鉴定 2 微课课件 二、基因表达载体的构建 获取了足够量的Bt基因后，下一步就是要让基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代； 同时，使Bt基因能够表达和发挥作用。 构建基因表达载体（核心工作） 基因表达载体由哪些部分组成 3 微课课件 位置： 功能： RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质。 基因的首端（一段有特殊结构的DNA片段） 人们所需要的基因 位置： 功能： 基因的尾端（一段特殊的DNA片断） 终止转录 用来鉴别或筛选含有重组DNA分子的细胞 基因表达载体的组成 二、基因表达载体的构建 4 微课课件 二、基因表达载体的构建 基因表达载体构建模式图 DNA分子 （含目的基因） 或能产生相同末端的限制酶切割 带有黏性末端或平末端的切口 带有相同黏性末端或平末端的目的基因片段 DNA连接酶 重组DNA分子 （重组质粒） 同一种限制酶切割 载体 （质粒） 5 微课课件 任务一 请结合下图，回答问题： 问题： 构建基因表达载体时，能否用SmaⅠ限制酶切割质粒？为什么？ 6 微课课件 任务一 请结合下图，回答问题： 问题： 构建基因表达载体时，能否用SmaⅠ限制酶切割质粒？为什么？ 不能 因为SmaⅠ切割会破坏质粒的抗生素抗性基因。 质粒上的抗性基因是标记基因，便于重组DNA分子的筛选，若被破坏，无法进一步筛选。 7 微课课件 任务二 问题：与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点是什么？ 请结合下图，回答问题： 8 微课课件 任务二 问题：与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点是什么？ ①可以防止质粒、目的基因的自身环化连接； ③还可以防止目的基因与载体的反向连接。 请结合下图，回答问题： ②可以防止质粒、目的基因的两两自身连接； 9 微课课件 使用一种限制酶进行切割，共有几种连接情况？ 应用过程中往往选择2种不同的限制酶同时对目的基因和质粒切割，减少自连情况出现 载体 目的基因 自连 片段间的连接 目的基因自连 质粒自连 目的基因与质粒连接 目的基因与目的基因连接 质粒与质粒连接 正向连接 反向连接 1 1’ 2 2’ 1 2 2’ 1’ 2 1’ 1 10 微课课件 三、将目的基因导入受体细胞 任务三 [阅读教材]阅读P80-82页内容及P81资料卡，找出并总结将目的基因导入受体细胞的具体操作方法。 受体细胞 将目的基因导入 植物细胞 将目的基因导入 动物细胞 将目的基因导入 微生物细胞 11 微课课件 三、将目的基因导入受体细胞 1、花粉管通道法 ②在植物授粉后一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴在花柱切面，使目的基因通过花粉管通道进入胚囊。 ①用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中； 花粉管通道法导入外源DNA 12 微课课件 三、将目的基因导入受体细胞 2、农杆菌转化法 农杆菌转化法步骤： 表现出新性状的植株 13 目的基因插入到农杆菌Ti质粒的T-DNA中 重组DNA转入农杆菌 农杆菌侵染植物将目的基因带入植物细胞 重组DNA整合到植物细胞的基因组中 目的基因遗传特性稳定维持和表达 微课课件 三、将目的基因导入受体细胞 3、显微注射法-动物细胞 目的基因的表达载体提纯 受精卵 显微注射 受精卵发育 获得具有新性状的动物 显微注射技术 ①个体大，易操作。 ②受精卵全能性高，易培养成