内容正文:
实验01 探究培养液中酵母菌种群数量的变化
1、提出问题:培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?
2.实验原理
①用液体培养基培养酵母菌,种群的增长受培养液的 、 、 、温度等因素的影响。
②在理想的环境条件下,酵母菌种群的增长呈 曲线增长;在有环境阻力的条件下,酵母菌种群的增长呈“S”形曲线增长。
③计算酵母菌数量可用抽样检测的方法——显微计数法。
3. 作出假设:
①培养液中的酵母菌数量一开始呈 增长;
②随着时间推移,由于营养物质的 、有害代谢产物的 、pH的 ,酵母菌数量呈 增长。
4.实验变量
自变量: ,因变量: ,无关变量: 等。
5.实验材料
酵母菌(可从公司购买或从大学等科研院所获得,也可使用安琪酵母自行纯化)
6.实验器具
(1)实验器材: (配备封口膜、皮筋)、 、微量移液器或滴管、 、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、恒温摇床、冰箱等。
(2)实验药品: 、
7.实验准备
①进行 ,以确定合适的接种量、培养条件和培养时间。
②在正式实验前训练学生操作显微镜和 的技能。
③本实验不能在一节课内完成,因此须提前规划,确保学生有足够的时间进行 。
④训练取样计数:取样前先 ,然后取样进行计数。
8.方法步骤
①酵母菌培养:配制 培养基,进行 以保证无菌条件。
②在一定温度下培养:
③观察并计数:首先要 培养液,以保证酵母菌 于培养液中。然后将含有酵母菌的培养液滴在 上,计数酵母菌密度,估算每mL培养液中酵母菌 。
④重复步骤③,连续观察7天,记录统计观察计数结果。
⑤绘图分析:将所得7天的统计数据用曲线表示(纵坐标是 ,横坐标是 ,得出酵母菌数量变化的规律。
8.酵母菌数量变化记录表
第1d
第2d
第3d
第4d
第5d
第6d
第7d
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1
2
3
4
5
平均值
总平均值
稀释倍数
酵母菌数量(个/mL)
9.酵母菌数量变化曲线
10.注意事项及解决措施
①从试管中吸出培养液进行计数之前,建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么?
②如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取怎样的措施?
③对于压在小方格界线上的酵母菌,应当怎样计数?
④本探究需要设置对照吗?如果需要,请讨论对照组应怎样设计和操作;如果不需要,请说明理由。
⑤本探究需要做重复实验吗?为什么?
⑥怎样记录结果?记录表怎样设计?
11.血细胞计数板
①血细胞计数板有16×25和25×16两种规格
25×16型血细胞计数板结构如下图所示:
②血细胞计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网。如下图所示:
一般计数四个角和中央的五个中方格(80个小方格)的细胞数。
16×25型血细胞计数板如下图所示:
一般计数四个角(100个小方格)的细胞数。
12.血细胞计数板计数方法
①方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用。
②大方格的长和宽各为1