内容正文:
首例胚胎移植成功
首创动物组织体外培养法
发现哺乳动物精子获能现象
体细胞核移植成功
试管家兔诞生
创立单克隆抗体技术
胚胎分割移植成功
分离和培养小鼠胚胎干细胞
克隆羊多莉诞生
获得诱导多能干细胞
单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生
我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。
1890年
1907年
1951年
1958年
1959年
1975年
1978年
1981年
1996年
2006年
2014年
2017年
2.动物细胞工程的发展历程
科技探索之路
2.2动物细胞工程
动物细胞培养
动物细胞融合
动物细胞核移植
动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础。
动物细胞工程
科技探索之路
动物细胞培养技术
动物细胞融合技术
动物细胞核移植技术
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
2.2.1 动物细胞培养
掌握动物细胞培养所需要的基本条件;
总结动物细胞培养的基本操作过程;
分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险?
在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。
可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增;
讨论:
怎样才能获得大量的自体健康皮肤?
能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供
移植的皮肤?
人造皮肤
到社会中去
概念:
从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
目的:
获得细胞或细胞产物;不能获得完整动物个体。
原理:
细胞增殖(有丝分裂)
实例:
那么,获得这些细胞或细胞产物的必要条件和具体过程又是怎样的?
克隆皮肤
皮肤烧伤
动物细胞培养
动物细胞培养的条件
一
动物体内的细胞之所以能够维持正常的生命活动,是因为机体给这些细胞提供了适宜的条件。你还记得有哪些条件吗?
糖类、氨基酸、无机盐、维生素 …
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
充足的营养、稳定的内环境
将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制的培养基。
1.营养
(1)培养基构成:
合成培养基
血清等一些天然成分
+
合成培养基:
血清等一些天然成分:
含有尚未研究清楚的细胞所需的营养物质
(2)培养基类型:
液体培养基
(培养液)
2.无菌、无毒的环境
动物细胞培养的条件
一
补充:培养基中加入抗生素
——抑制细菌生长
①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理
②在无菌环境下进行操作
无菌
清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
培养液需要定期更换:
无毒
补充:添加抗生素
3.温度、pH和渗透压
(1)适宜的温度:
哺乳动物多以___________为宜;
36.5±0.5℃
(2)适宜的pH:
多数细胞生存的适宜pH为________;
7.2-7.4
(3)适宜的渗透压:
目的________________________。
维持细胞正常的形态和功能
4.气体环境:
动物细胞培养的条件
一
(2)具体操作:
通常采用培养皿或松盖培养瓶。
置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。
(1)气体组成及作用:
O2:
CO2:
细胞代谢所必需
维持培养液的pH
培养皿
培养瓶
阅读P44-45 动物细胞培养的过程,思考以下问题:
1.为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢?可用什么方法?
2.体外培养的动物细胞有哪些类型?
3.什么是原代培养和传代培养?
4.什么是细胞贴壁?什么是接触抑制?
5.为什么要进行分瓶培养?怎么处理?
6.动物细胞培养与植物组织培养有什么相同之处与不同之处?
动物细胞培养的过程
二
我们将按照这六道题的思路来学习动物细胞培养的过程。这些问题中涉及到一些生物专有名词,大家在寻找答案的同时尝试初步理解。
用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理,去掉组织间蛋白,将组织分散成单个细胞
动物组织处理后的初次培养
取动物组织
制成细胞悬液
转入培养液进行原代培养
悬浮生长类:
贴壁生长类:
(大多数)
体外培养的动物细胞
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂增殖。
会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。
除受以上因素影响外,还会发生接触抑制现象。
放入
CO2培养箱
中培养
1.可以用胃蛋白酶处理吗?用胰蛋白酶处理组织有没有什么需要注意的?控制好时间,细胞膜含有蛋白质,长时间处理会损伤细胞,要控制好时间。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2,当pH大于6时,胃蛋白酶就会失去活性。
2.根据生长情况可以将培养的动物细胞分为两类:大多数细胞贴附在培养