内容正文:
专题08 绿叶中色素的提取和分离
1.实验原理:
(1)提取绿叶中的色素溶于有机溶剂,而不溶于水;
(2)分离各种色素在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快,反之则慢。
2.实验过程及现象:
(1)提取绿叶中的色素
称取5g左右的鲜叶,去叶脉,剪碎,放入研钵中。加少许的石英砂(有助于研磨充分)和碳酸钙 (中和细胞中的酸,防止镁从叶绿素分子中移出,防止研磨中色素被破坏)与10ml无水乙醇(为了溶解、提取色素)。在研钵中快速研磨,将研磨液进行过滤。
(2) 分离绿叶中的色素
①制备滤纸条:长6cm 宽1cm,剪去一端的两角,在距离剪角一端1cm处用铅笔画一条线
②画滤液细线:直、 细 、齐;色浓。 用毛细吸管,吸取少量滤液,沿着铅笔线均匀地画,待滤液干燥后再画2—3次。
③分离色素:3ml层析液,将滤纸条有滤液细线的一端朝下,略微倾斜靠着烧杯内壁,轻轻插入层析液,用培养皿盖盖上烧杯。
(2)实验结果和结论
色素种类
颜色
吸收光谱
胡萝卜素
类胡萝卜素(含量约占1/4)
橙黄色
主要吸收蓝紫光
叶黄素
黄色
叶绿素a
叶绿素(含量约占3/4)
蓝绿色
主要吸收蓝紫光和红光
叶绿素b
黄绿色
3.实验分析:
(1)色素带的条数与色素种类有关,四条色素带说明有四种色素。
(2)色素带的宽窄与色素含量有关,色素带越宽说明此种色素含量越多。色素带最宽的是叶绿素a,最窄的是胡萝卜素,叶绿素b的色素带比叶黄素的稍宽。
(3)色素带扩散速度与溶解度有关,扩散速度越快说明溶解度越高。
(4)相邻两条色素带之间距离最远的是胡萝卜素和叶黄素,最近的是叶绿素a和叶绿素b。
1.实验操作注意事项及结果分析
(1)过滤时漏斗基部的单层尼龙布不可以用滤纸代替,是因为滤纸的吸附性强,会导致滤液中色素的浓度过低。
(2)制备滤纸条时,剪去滤纸条的两角可以防止层析液在滤纸条的边缘处扩散过快,即:使层析液在滤纸条上扩散速度均衡,这样有利于得到清晰整齐的色素带。
(3)画滤液细线的要求是细、直、齐;待滤液干后,再重画一到两次可以增加滤液细线中色素的含量。
(4)分离色素时,为防止滤液细线上的色素溶解到层析液中,不能让滤液细线触及层析液。
2.实验出现异常现象的原因分析
(1)收集到的滤液绿色过浅
①未加二氧化硅,研磨不充分;
②使用放置数天的菠菜叶,滤液色素(叶绿素)太少;
③一次加入大量的无水乙醇,提取液浓度太低(正确做法:分次加入少量无水乙醇);
④未加碳酸钙或加入过少,色素分子被破坏
(2) 滤纸条色素带重叠
①滤液细线不直;
②滤液细线过粗
(3) 滤纸条无色素带
①忘记画滤液细线;
②滤液细线接触到层析液,且时间较长,色素全部溶解到层析液中
1.(2023·江苏·统考高考真题)下列关于“提取和分离叶绿体色素”实验叙述合理的是( )
A.用有机溶剂提取色素时,加入碳酸钙是为了防止类胡萝卜素被破坏
B.若连续多次重复画滤液细线可累积更多的色素,但易出现色素带重叠
C.该实验提取和分离色素的方法可用于测定绿叶中各种色素含量
D.用红色苋菜叶进行实验可得到5条色素带,花青素位于叶绿素a、b之间
2.(2023·全国·统考高考真题)植物叶片中的色素对植物的生长发育有重要作用。下列有关叶绿体中色素的叙述,错误的是( )
A.氮元素和镁元素是构成叶绿素分子的重要元素
B.叶绿素和类胡萝卜素存在于叶绿体中类囊体的薄膜上
C.用不同波长的光照射类胡萝卜素溶液,其吸收光谱在蓝紫光区有吸收峰
D.叶绿体中的色素在层析液中的溶解度越高,随层析液在滤纸上扩散得越慢
3.(2020·江苏·统考高考真题)采用新鲜菠菜叶片开展“叶绿体色素的提取和分离”实验,下列叙述错误的是( )
A.提取叶绿体色素时可用无水乙醇作为溶剂
B.研磨时加入CaO可以防止叶绿素被氧化破坏
C.研磨时添加石英砂有助于色素提取
D.画滤液细线时应尽量减少样液扩散
4.(2023·海南·高考真题)海南是我国火龙果的主要种植区之一、由于火龙果是长日照植物,冬季日照时间不足导致其不能正常开花,在生产实践中需要夜间补光,使火龙果提前开花,提早上市。某团队研究了同一光照强度下,不同补光光源和补光时间对火龙果成花的影响,结果如图。
回答下列问题。
(1)光合作用时,火龙果植株能同时吸收红光和蓝光的光合色素是 ;用纸层析法分离叶绿体色素获得的4条色素带中,以滤液细线为基准,按照自下而上的次序,该光合色素的色素带位于第 条。
(2)本次实验结果表明,三种补光光源中最佳的是 ,该光源的最佳补光时间是 小时/天,判断该光源是最佳补光光源的依据是 。
(3)现有可促进火龙果增产的三种