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>微课(2)】
与酶相关的实验探究
[微课突破]
一、“酶解法”鉴定酶的本质
1.设计思路
常见的酶化学本质大多数是蛋白质,如淀粉酶、蛋白酶等,对酶本质的鉴定使用鉴定蛋
白质或RNA的方法。
2.设计方案
标准蛋白质样液
待测酶液
双缩脲试剂
紫色反应
紫色反应
未发生紫色反应
该酶是蛋白质
该酶是RNA
二、“对比实验法”探究或验证酶的高效性和专一性
1.验证酶的高效性
(1)设计思路:通过将不同类型催化剂(主要是酶与无机催化剂)催化底物的反应速率进行
比较,得出结论。
(2)设计方案
项目
实验组
对照组
材料
等量的同一种底物
试剂
与底物相对应的酶溶液(如生物材料研磨液)
等量的无机催化剂
现象
反应速率较快或反应用时较短
反应速率较缓慢或反应用时较长
结论
酶具有高效性
2.验证酶的专一性
(①)设计思路:常见的方案有两种,即底物相同但酶不同或底物不同但酶相同,最后通过
观察酶促反应能否进行得出结论。
(2)设计方案
方案
方案二
项目
实验组
对照组
实验组
对照组
材料
同种底物(等量)
与酶相对应的底物
另外一种底物
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试剂
与底物相对应的酶
另外一种酶
同一种酶(等量)
现象
发生反应
不发生反应
发生反应
不发生反应
结论
酶具有专一性
三、“梯度法”探究酶的最适温度和最适pH
1.设计思路
底物温度(或pH)下+酶,温度(或pH)下
底物2温度(或pH)下+酶温度(或pH)下
底物,温度(或pH)下+酶t。温度(或pH)下
检测底物的分解量(或剩余量或产物的生成量)》
2.设计方案
若干组等量底物
若干组等量酶
各自在所控制的温度下处理一段时间
底物与相应温度的酶混合
在各自所控制的温度下保温一段时间
检测
酶液
酶液
酶液
pH
pH
pH.
各自与等量底物混合
反应一段时间
检测
[微训练]
1.猪笼草是一种食虫植物,为了验证猪笼草分泌液中有蛋白酶,某学生设计了两组实验,
如图所示,在35℃水浴中保温一段时间后,甲、乙试管中加入适量的双缩脲试剂,丙、丁试
管中不加任何试剂,下列对实验现象的预测正确的是()
加分泌液
加水
加分泌液
加水
蛋白液
蛋白块
实验①
实验②
A.甲和乙中溶液都呈紫色:丙和丁中蛋白块消失
B.甲中溶液呈紫色,乙中溶液不呈紫色;丙中蛋白块消失、丁中蛋白块不消失
C.甲和乙中溶液都呈紫色;丙中蛋白块消失、丁中蛋白块不消失
D.甲和乙中溶液都不呈紫色:丙中蛋白块消失、丁中蛋白块不消失
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解析本实验属于验证性实验,分泌液中含有蛋白酶,蛋白酶的化学本质是蛋白质。鉴
定蛋白质常用的试剂是双缩脲试剂,反应后溶液呈紫色。实验①中的甲和乙试管始终显示紫
色,不能形成对照:而实验②改用观察蛋白块的存在情况(丙中蛋白块消失、丁中蛋白块不消
失),形成鲜明的对照,说明了猪笼草的分泌液中含有蛋白酶。
答案C
2.(2023福州期未)下列有关酶的探究实验的叙述,合理的是()
选项
探究内容
实验方案
用F©Cl3和过氧化氢酶分别催化等量H2O2分解,待HzO2
A
酶的高效性
完全分解后,检测产生的气泡数量
B
酶的专一性
用淀粉酶分别催化淀粉蔗糖水解,用碘液检测
温度对酶活
用淀粉酶分别在高温、低温和常温下雀化淀粉水解反应相
性影响
同时间后,检测淀粉分解程度
pH对酶活
用H2O2酶在不同pH条件下催化H2O2分解,用斐林试剂
D
性的影响
检测
解析用下C,和过氧化氢酶分别催化等量H2O2分解,待HO2完全分解后,检测产生
的气体总量是相等的,因此该实验方案不能用来探究酶的高效性,A不合理:碘液遇淀粉变
蓝,蔗糖及蔗糖水解产物都无法用碘液检测,因此用淀粉酶催化淀粉和蔗糖的水解来验证酶
的专一性时,不能用碘液检测,可以选用斐林试剂作为检测试剂,B不合理:用淀粉酶分别
在100℃、60℃和0℃下催化淀粉水解,反应相同时间后,可用碘液检测淀粉分解程度,该
实验方案可以用米探究温度对酶活性影响,C合理:,斐林试剂是检测还原性糖的,用H2O2
酶在不同H条件下催化H2O2分解,没有还原性糖产生,因此该实验不能用斐林试剂检测,
D不合理。
答案C
3,探究温度对酶活性影响最合理的实验步骤是()
①取3支试管编号,注入2mL淀粉溶液:另取3支试管编号,各注入1mL新鲜的淀粉
酶溶液
②将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液试管中,维持各自的温度5mn
③向各试管滴一滴碘液
④将6支试管分成三组,每组各