内容正文:
胚胎工程
理论基础:
A.受精:
1.准备阶段:
精子获能:刚排出的精子不能立即与卵子受精,必须在雌性生殖道发生相应的生理变化后,才能获得受精能力(穿入卵子的能力)。任何导致精子质膜稳定性下降(胆固醇下降)和钙离子内容的因素均能引起精子获能。
获能部位:子宫和输卵管
(了解)获能方法:1.咖啡因;血清白蛋白(去除部分胆固醇);肝素(钙离子进入精子细胞);钙离子载体(直接诱发钙离子进入精子细胞内部)
卵子:减Ⅱ中期
2.受精过程
1) 精子穿过卵丘细胞
2) 精子与透明带结合
3) 顶体反应:精子头部前段与卵子透明带接触后,通过配体-受体相互作用,顶体质膜和顶体外膜融合,顶体内小泡囊泡化,顶体内膜暴露,顶体内酶被激活并释放的胞吐过程
意义:顶体反应完成后,精子即可具有穿过透明带的能力
4) 精子穿过透明带
5) 精子和卵子融合;发生透明带反应。
6) 激活卵子:进入减II后末期,完成第二极体的排出;发生卵细胞膜反应
7) 雌原核和雄原核的形成
8) 雌原核和雄原核相互融合
B.胚胎早期发育:
1) 卵裂球:卵裂期,分裂速度快,细胞体积变小,总体积基本不变。胚胎发育的2-8细胞期,每个细胞都具有全能性。
2) 桑葚胚:16~32细胞
3) 囊胚
a) 内细胞团
b) 滋养层
c) 囊胚腔
4) 着床
5) 原肠胚
胚胎工程技术
A.胚胎移植
1. 胚胎移植技术
a) 生理学基础
i. 母畜发情后生殖器官的孕向发育:在发情后的之后一段时间里(周期性黄体期),母畜不论是否受精,生殖系统均处于相同的生理状态下,妊娠与未孕并无区别。所以,发情后母畜生殖器官的孕向变化,是进行胚胎移植,不配种的受体母畜可以接受胚胎并为胚胎发育提供所需各种条件的主要生理依据。
ii. 早期胚胎的游离状态:着床前;囊胚期。
iii. 胚胎的遗传特性:胚胎的遗传特性(基因型)是由供体决定的。
iv. 生殖道对移植胚胎的免疫耐受性:受体母畜的生殖道(子宫或输卵管)对于具有外来抗原物质的胚胎和胎膜组织,一般来说在同一物种之内有耐受性,并没有明显的排斥现象。
b) 基本原则
i. 胚胎移植前后所处环境的同一性
1. 供体和受体在分类学上的相同属性:同一物种
2. 动物生理上的一致性:发情时间的同期性,移植的胚胎与受体在生理上是同步的。
3. 动物解剖部位的一致性:空间部位的相似性
ii. 胚胎发育的时限:不能在开始附植之时。
iii. 胚胎质量
iv. 供受体的状况
1. 生产性能和经济价值
2. 全身及生殖器官的生理状态:身体健康,营养良好,体质健壮,特别是生殖器官具有正常生理技能。
2. 流程
供受体的选择
i. 供体的选择
1. 供体应具备遗传优势
2. 供体应具有良好的繁殖能力
3. 供体应营养良好
4. 生理生化指标:血清孕酮含量等;
ii. 受体的选择
1. 一般的个体
2. 具有正常繁殖史
iii. 受体饲养管理
1. 传染病,寄生虫
2. 营养丰富
3. 注意天气变化(同期发情)
iv. 供受体搭配
1. 发情时间的搭配
2. 供受体配比:避免受体过剩或胚胎浪费
操作流程:
a) 供体母本超数排卵:促性腺激素
i. 影响因素
1. 家畜个体情况对超排效果的影响
a) 品种
b) 年龄
c) 产后日期
d) 生殖机能
e) 重复超排
2. 环境条件对超数排卵效果的影响
a) 季节和月份(饲料的类型和日粮的组成;严寒和酷暑对畜体造成应激)
b) 畜舍环境条件:健康
3. 超数排卵处理方法的影响
a) 促性腺激素的类型
b) 促性腺激素的生产厂家和批次
ii. 供体的配种
1. 配种:发情配种或人工授精
b) 胚胎采集:也称采胚,冲胚。用冲卵液将胚胎由生殖道(输卵管或子宫)中冲出,并收集在器皿中。
i. 采胚时间的确定:配种时间,排卵时间,胚胎运行速度和胚胎在生殖道的发育速度等因素。
c) 胚胎的鉴定与保存
i. 胚胎的检查与鉴定
1. 胚胎检查:在立体显微镜下,从冲卵液中寻找胚胎。冲卵液放置在30℃无菌箱中。
2. 胚胎发育期的划分
3. 胚胎分级
4. 胚胎鉴定:1.形态学方法;2.体外培养法;3.活体染色法;4.测定代谢活性;5.胚胎计数。
ii. 影响胚胎质量的因素
1. 影响胚胎质量的内在因素:供体及体内环境。
2. 超数排卵的时间
3. 回收胚胎的发育阶段
d) 胚胎的移植
i. 受体:同期发情
ii. 胚胎移植:手术移植/非手术移植。移植时,应遵循空间一致性的原则。
iii. 供受体的护理和观察
iv. 影响胚胎移植妊娠率的因素:1.胚胎因素;2.母体因素;3.环境因素。
配套练习:
1.(2020.04台州二模;9)杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点,被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如图所示,相关叙述正确