内容正文:
第 3 讲 基因工程及生物技术的安全性与伦理问题
课标要求
1.概述基因工程是在遗传学、微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展而来的
2.阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具
3.阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测鉴定等步骤
4.举例说明基因工程在农牧、食品及医药等行业的广泛应用改善了人类的生活品质
5.概述人们根据基因工程原理,进行蛋白质设计和改造,可以获得性状和功能更符合人类需求的蛋白质
6.举例说明依据人类需要对原有蛋白质结构进行基因改造、生产目标蛋白的过程
7.转基因产品的安全性引发社会的广泛关注;中国禁止生殖性克隆人;世界范围内应全面禁止生物武器
第 1 课时 系统主干知识,夯实备考基础 (概念理清课)
[建知识体系]
[记核心语句]
1.限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。
2.质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外,并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。
3.载体上有特殊的标记基因,便于重组DNA分子的筛选。
4.PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行,需提供DNA模板,2种引物,4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶。
5.DNA分子具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下,这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动。
6.在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。
7.对蛋白质的结构进行设计改造,最终还必须通过改造或合成基因来完成。
8.生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官用于治疗疾病。
9.我国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。
系统学习(一) 重组DNA技术的基本工具
主干知识·系统成
(一)基因工程的概念解读
(二)基因工程的基本工具
1.限制性内切核酸酶——“分子手术刀”
存在
主要存在于原核生物中
作用
识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开
特征
一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列,并且能在特定的位点上切割DNA分子
结果
产生黏性末端和平末端
2.DNA连接酶——“分子缝合针”
种类
E.coli DNA连接酶
T4 DNA连接酶
来源
大肠杆菌
T4噬菌体
特点
只缝合黏性末端
缝合黏性末端和平末端
作用
恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,连接两个DNA片段
3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
类型
常用:质粒;其他:噬菌体、动植物病毒等
条件
①能自我复制或整合到受体 DNA 上,使目的基因稳定存在且数量可扩增;②具有一个至多个限制酶切割位点,便于外源DNA片段插入;③具有特殊的标记基因,供重组DNA分子的筛选
作用
携带外源DNA片段进入受体细胞
(三)DNA的粗提取与鉴定
1.实验原理
DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在差异,可以利用这些差异,选用适当的物理或化学方法对它们进行提取。
(1)DNA不溶于酒精。
(2)DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,它能溶于2_mol/L的NaCl溶液。
(3)在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。
2.实验步骤
澄清概念微练
一、判断叙述正误
(1)E.coli DNA连接酶既可连接平末端,又可连接黏性末端。(×)
(2)限制酶也可以识别和切割RNA。(×)
(3)质粒是小型环状DNA分子,是基因工程常用的载体。(√)
(4)重组DNA技术所需要的工具酶有限制酶、DNA连接酶和载体。(×)
(5)切割质粒的限制性内切核酸酶均能特异性地识别6个核苷酸序列。(×)
(6)DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事。(×)
二、教材情境思考
(1)(选择性必修3 P71旁栏思考拓展)限制酶来源于原核生物,为什么不能切割自己的DNA分子?
提示:限制酶具有特异性,即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的位点上进行切割。限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
(2)(选择性必修3 P72旁栏思考拓展)DNA连接酶和DNA聚合酶的作用相同吗?试简要说明。
提示:不相同。DNA连接酶连接的是两个DNA片段,而DNA聚合酶是将单个脱氧核苷酸依次连接到DNA单链的末端。
题点考法·训练到
题点(一) 基因工程的操作工具
1.限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及其切割位点分别为