内容正文:
第 2 课时 微生物的培养技术及应用 (概念理清课)
[建知识体系]
[记核心语句]
1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2.消毒仅杀死物体表面或内部一部分对人体等有害的微生物,灭菌是杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
3.平板划线法是通过接种环连续划线,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面,不可以用来对微生物计数。
4.稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。
5.平板划线操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。
6.如果基础培养基中的菌落数明显大于选择培养基中的数目,则说明该选择培养基有选择功能。
7.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,利用以尿素为唯一氮源的选择培养基,可从土壤中分离出分解尿素的细菌。
系统学习(一) 培养基及微生物的纯培养技术
主干知识·系统成
(一)培养基的配制
1.培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质。
2.种类
3.成分
各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
(二)无菌技术
1.含义:在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
2.常用方法
消毒
灭菌
条件
较为温和的物理、化学或生物等方法
强烈的理化方法
结果
杀死物体表面或内部的部分微生物
杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子)
常用方法
煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法
湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌
(三)微生物的纯培养
1.概念:由单一个体繁殖所获得的微生物群体是纯培养物,获得纯培养物的过程就是纯培养。
2.过程:包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等。
3.常用方法:平板划线法和稀释涂布平板法。
4.实例——酵母菌的纯培养
澄清概念微练
一、判断叙述正误
(1)在培养细菌时,要将培养基调至中性或弱酸性。(×)
(2)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害。(√)
(3)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(×)
(4)待灭菌后的培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。(√)
(5)平板划线法中每一次划线后要将接种环灼烧。(√)
(6)倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上。(×)
二、教材情境思考
(1)(选择性必修3 P10旁栏思考)无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么作用?
提示:还能有效避免操作者自身被微生物感染。
(2)根据教材选择性必修3 P12“探究·实践”相关内容及图示分析以下问题:
①为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
提示:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面湿度也比较高,将平板倒置,既可以防止培养基表面的水分过快地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
②平板划线法在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?目的是什么?
提示:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,第二次以及其后的划线从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。这样做的目的是将聚集的菌种逐步稀释分散以便获得单个菌落。
核心要点·逐一盘
(一)培养基及消毒和灭菌
1.培养基营养成分的作用
成分
含义
作用
碳源
提供碳元素的物质
构成生物体细胞的物质和一些代谢物,有些也是异养生物的能源物质 构成生物体细胞的物质和一些代谢物,有些也是异养生物的能源物质
氮源
提供氮元素的物质
合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢物
无机盐
为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素,包括大量元素和微量元素
是细胞的组成成分、生理调节物质、某些化能自养菌的能源,酶的激活剂等
水
生物体内含量很高的无机物
不仅是良好的溶剂,而且可维持生物大分子结构的稳定
2.比较消毒和灭菌
方法
常用方法
应用范围
消毒
煮沸消毒法
日常用品
巴氏消毒法
不耐高温的液体,如牛奶
化学药剂消毒法
用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源
灭菌
灼烧灭菌法
接种工具
干热灭菌法
玻璃器皿、金属用具
湿热灭菌法
培养基及容器
消毒和灭菌都是通过一定的理化手