第10单元 第2讲 微生物的培养与应用（Word教参）-【新高考方案】2024高考生物一轮复习（老教材 新高考）

第二讲　微生物的培养与应用 落实主干知识 一、培养基 1．概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2．种类 (1)按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。 (2)按功能可分为选择培养基和鉴别培养基。 3．成分：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 二、无菌技术 1．关键：防止外来杂菌的入侵。 2．常用方法 项目 理化因素的作用强度 能否消灭芽孢和孢子 常用方法 消毒 较为温和 不能 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法 灭菌 强烈 能 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 [微提醒]　消毒和灭菌的最大区别是芽孢和孢子是否存活。 三、大肠杆菌的纯化培养 1．制备固体培养基的步骤 →→→→ 2．纯化大肠杆菌：最常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。 [微提醒]　平板划线法常用于菌种的分离，稀释涂布平板法常用于菌种的分离和计数。 3．菌种的保存 (1)对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。 (2)对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。 1．培养基的成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源及生长因子等。 (1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质。(√) (2)制备固体培养基的步骤包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板等。(√) (3)在液体培养基中加入凝固剂琼脂，制成琼脂固体培养基。(√) (4)培养霉菌时需将培养基pH调至中性或微碱性。(×) (5)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上。(×) 2．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。 (1)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对材料本身及操作者细胞的伤害。(√) (2)为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。(×) (3)需要对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和灭菌。(×) (4)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。(√) (5)日常生活中经常用到的消毒方法是煮沸消毒法。(√) 3．微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。 (1)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落。(√) (2)对细菌进行计数只能采用稀释涂布平板法。(×) (3)接种后，在固体培养基上培养细菌时进行倒置培养的目的是防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上造成污染。(√) (4)用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。(√) 深化拓展提能 一、归纳培养基的种类和作用 1．按物理状态分类 培养基种类 特点 用途 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体培养基 加凝固剂(如琼脂) 观察微生物的运动、分类鉴定 固体培养基 加凝固剂(如琼脂) 微生物的分离、鉴定，活菌计数，菌种保藏 2.按功能分类 种类 制备方法 原理 用途 举例 选择培养基 培养基中加入某些化学物质 依据某些微生物对某些物质的特殊需求或抗性而设计 从众多微生物中分离所需的微生物 加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 鉴别培养基 培养基中加入某种指示剂或化学药品 产生特定的颜色或其他变化 鉴别不同种类的微生物 用伊红美蓝培养基鉴别大肠杆菌 　　二、比较消毒和灭菌 方法 条件 结果 常用方法 应用范围 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部的部分微生物 煮沸消毒法 日常用品 巴氏消毒法 不耐高温的液体 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 灼烧灭菌法 接种工具 干热灭菌法 玻璃器皿、金属用具 高压蒸汽灭菌法 培养基及容器 三、微生物的纯化培养 1．比较平板划线法和稀释涂布平板法的区别 比较项目 平板划线法 稀释涂布平板法 关键操作 接种环在固体培养基表面连续划线 ①一系列的梯度稀释 ②涂布平板操作 注意事项 每次划线前后均需灼烧接种环 稀释度要足够高，为确保实验成功可以增加稀释度的范围 菌体获取 在具有显著的菌落特征的区域挑取菌体 从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌体 适用范围 适用于好氧菌 适用于厌氧菌和兼性厌氧菌 优点 可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落 既可以获得单细胞菌落，又能对微生物计数 缺点 不能对微生物计数 操作复杂，需要涂布多个平板 2．归纳概括平板划线操作的注意事项 (1)灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 (2)第二次