内容正文:
高中生物选修
主讲:
一、基因工程
(一)基因工程的概念及原理
1.概念:
基因拼接技术、DNA重组技术。
通过体外 DNA 重组和转基因技术,赋予生物新的遗传特性
2.原理:
基因重组
(二)基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”又叫基因剪刀——限制性内切酶
黏性末端
黏性末端
来源:主要从原核细胞分离
作用:一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核糖核苷酸序列
作用实质:使特定部位的两核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
作用结果:平未端、黏性未端
小试牛刀
图4是4个DNA分子的末端示意图,由同一内切酶切出来的组黏性末端是(B )。
A.①②
B.②④
C.③④
D.②③
2.“分子缝合针”又叫基因针线——DNA连接酶
(1)种类:
(2)连接部位:
(3)结果:两个相同的黏性末端的连接。
E·coli DNA连接酶(黏性末端)
T4 DNA连接酶 (黏性末端和平末端)
磷酸二酯键
3.“分子运输车”又叫基因的运输工具——载体
(1)作用:将外源基因送入受体细胞。
(2)条件:能在宿主细胞内复制并稳定地保存;
具有多个限制酶切点;
具有某些标记基因。
(3)质粒的特点:细胞染色体外能自我复制的小型环状DNA分子。
(4)其他载体:λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。
(三)基因工程的基本操作程序
1.目的基因的获取
目的基因:主要是指编码蛋白质的结构基因
获取方法:
(1)从基因文库中获取
(2)人工合成:逆转录法、化学合成法
(3)PCR扩增
基因文库的构建
提取某种生物的全部DNA
用适当的限制酶切
一定大小的DNA片段
将DNA片段与载体连接
导入受体菌中储存
基因组文库
某种生物的mRNA
单链互补DNA
双链cDNA片段
导入受体菌中储存
与载体连接
cDNA文库
逆转录
(2)人工合成法:逆转录法、化学合成法
2.基因表达载体的构建
基因工程的核心
目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在
基因表达载体通常由目的基因、启动子、终止子、标记基因等组成。
小试牛刀
水母发光蛋白由236个氨基酸构成,编码该蛋白的基因可作为标记基因。在转基因技术中,这种蛋白质的作用是( D )。
A.使目的基因容易成功表达
B.使目的基因在宿主细胞中复制
C.使目的基因容易导入宿主细胞中
D.使成功转基因的个体容易被检测出来
3.将目的基因导入受体细胞
导入植物细胞:
导入动物细胞:
导入微生物细胞:
受体细胞 导入方法
体细胞
受精卵
花粉管通道法
基因枪法
农杆菌转化法
受精卵
显微注射法
Ca2+处理法
将目的基因导入微生物细胞
原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,故早期常作为受体细胞。
大肠杆菌细胞
用Ca2+处理
感受态细胞
重组表达载体DNA
溶于缓冲液
混合
导入
4.目的基因的检测与鉴定
个体水平上的检测:抗虫、抗病鉴定。
检测:是否插入了目的基因:分子杂交技术
目的基因是否转录:分子杂交技术
目的基因是否翻译成蛋白质:抗原—抗体杂交
小试牛刀
下列选项中不属于基因工程中目的基因的检测与鉴定方法的是( A )。
A.花粉管通道法
B.分子杂交技术
C.抗原一抗体杂交
D.抗虫或抗病的接种实验
(四)基因工程的应用
1.植物基因工程
培育抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。
2.动物基因工程
提高动物生长速度,改善畜产品的品质,
用转基因动物生产药物,用转基因动物做器官移植的供体。
3.基因工程制药
制造胰岛素,细胞因子,抗体疫苗,激素等。
4.基因治疗
小试牛刀
科学家使用现代生物技术培育出一种乳汁中含有抗病蛋白的奶牛,实现该技术是通过(D )。
A.向牛奶中添加外源抗病蛋白基因
B.在奶牛幼崽的饲料中添加抗病蛋白
C.向奶牛的乳腺中注射外源抗病蛋白基因
D.在奶牛的受精卵DNA中插入外源抗蛋白基因
四、胚胎工程
(一)动物胚胎发育的基本过程
场所:睾丸的曲细精管
时期:初情期开始。
变形:细胞核-精子头,高尔基体-顶体,中心体-尾
线粒体-尾基部的线粒体鞘,其他物质-原生质滴向后脱落。
精子的发生
卵子的发生
场所:卵巢及输卵管。
时期:
胎儿性别分化后:卵原细胞有丝分裂,并变成初级卵母细胞,被卵泡细胞包围形成卵泡。
初情期后:初级卵母细胞——次级卵母细胞和第一极体——减二中期——卵子、极体。
1.受精作用
(1)定义
精子和卵子结合形成合子(即受精卵)的过程。
(2)场所
在输卵管中。
(4)过程
受精前的准备阶段
准备阶段1:精子获能
准备阶段2:卵子的准备
受精阶段
受精的标志:在卵黄膜和透