内容正文:
3.1重组DNA技术的基本工具
【教材课后习题】
1.DNA连接酶是重组DNA技术常用的一种工具酶。下列相关叙述正确的是( )
A.能连接DNA分子双链碱基对之间的氢键
B.能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端,形成磷酸二酯键
C.能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段,重新形成磷酸二酯键
D.只能连接双链DNA片段互补的黏性末端,不能连接双链DNA片段的平末端
2.在重组DNA技术中,将外源基因送入受体细胞的载体可以是( )
A.大肠杆菌的质粒 B.切割DNA分子的酶
C.DNA片段的黏性末端 D.用来识别特定基因的DNA探针
3.想一想,为什么限制酶不切割细菌本身的DNA分子?
4.有2个不同来源的DNA片段A和B,A片段用限制酶SPeⅠ进行切割,B片段分别用限制酶HindⅢ、XbaⅠ、EcoRⅤ和XhoⅠ进行切割。各限制酶的识别序列和切割位,点如下。
(1)哪种限制酶切割B片段产生的DNA片段能与限制酶SPeⅠ切割A片段产生的DNA片段相连接?为什么?
(2)不同的限制酶切割可能产生相同的黏性末端,这在基因工程操作中有什么意义?
【定点变式训练】
5.下列关于基因工程中限制酶的叙述,正确的是( )
A.限制酶广泛存在于各种生物中,所有限制酶的切割位点都相同
B.基因工程中所使用的工具酶就是限制酶,其活性受温度影响大
C.大多数限制酶能识别由6个核苷酸组成的序列
D.限制酶的识别序列越长,该序列在DNA中出现的概率就越大
6.下列关于基因工程工具的说法不正确的是( )
A.DNA连接酶与限制酶均受温度、pH等因素的影响
B.DNA连接酶对所连接的DNA两端的碱基序列有专一性要求
C.运载体能将外源基因导入受体细胞并使其在受体细胞中稳定遗传并表达
D.在基因工程操作中,被用作运载体的质粒一般都是经过人工改造的
7.DNA连接酶是重组DNA技术常用的一种工具酶。下列相关叙述正确的是( )
A.E.coliDNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端,也能连接平末端
B.DNA连接酶连接的是两条单链上的磷酸和脱氧核糖
C.DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键
D.DNA连接酶可以将单个的脱氧核苷酸连接到主链
8.以下关于基因工程操作工具的叙述,正确的是( )
A.DNA连接酶能够催化核糖核苷酸之间形成磷酸二酯键
B.限制酶能识别并切割DNA分子内一段特定的核苷酸序列
C.质粒一般具有复制原点、酶切位点和抗生素合成基因等
D.DNA聚合酶可将目的基因和载体连接形成重组DNA
9.关于如图所示黏性末端的说法,正确的是( )
A.甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的
B.乙中的酶切位点在A与G之间
C.如果甲中的G突变为A,则该限制酶不能识别图甲所示的序列
D.构建基因表达载体所用的限制酶和DNA连接酶分别作用于a处和b处
10.下列关于载体的叙述中,错误的是( )
A.载体与目的基因结合后,实质上就是一个重组DNA分子
B.在基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的
C.目前常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒等
D.载体具有某些标记基因,便于对其进行切割
11.下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述,正确的是( )
A.用限制酶剪切获得一个目的基因时得到两个切口,有2个磷酸二酯键被断开
B.序列—CATG↓—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端碱基数不同
C.限制酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的概率就越大
D.T4DNA连接酶和E.coliDNA连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接
12.根据基因工程的有关知识,回答下列问题。
(1)限制酶切割DNA分子后产生的片段,其末端形式有_________和_________。
(2)质粒用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:
为使载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA片段除可用EcoRⅠ切割外,还可用其他限制酶切割,“其他限制酶”必须具有的特点是_______________________。
(3)实际操作中,往往用EcoRⅠ和另一种限制酶同时切割质粒和外源DNA分子,其优点在于可防止__________________。
(4)按其来源不同,基因工程中常常使用的DNA连接酶有两类,即__________DNA连接酶和__________DNA连接酶。
(5)基因工程中除质粒外,__________和__________也可作为载体。质粒中通常含有特殊的标记基因,这些标记基因的作用是____________________。
答案以及解析
1.答案:C
解析:A、DNA连接酶连接的磷酸二酯键,A错误; B、DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端,形成磷酸二酯键,B错