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第3章 基因工程——单元测
1. 若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙),限制酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT),EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是( )
A. 用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
B. 用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
C. 用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
D. 用EcoRⅡ和Sau3AⅠ切割目基因和P1噬菌体载体
2. 农杆菌中的Ti质粒是植物基因工程中常用的载体,相关叙述正确的是( )
A. Ti质粒是能够自主复制的单链DNA
B. Ti质粒中磷酸基团都与两个脱氧核糖相连接
C. 重组Ti质粒的受体细胞只能是植物愈伤组织细胞
D. Ti质粒上的基因可全部整合到受体细胞染色体上
3. 利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。下列叙述错误的是( )
A. 用PCR方法扩增目的基因时不需知道基因的全部序列
B. 设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连
C. 复性温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物
D. 第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例为15/16
(2022·北京高三一模)
4. 下图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息,将二者构建的重组质粒导入受体菌并进行筛选。下列叙述错误的是( )
注:AmpR:氨苄青霉素抗性基因,TetR:四环素抗性基因
A. 应选择的限制酶组合是酶F和酶G
B. 所选用的受体菌不能含有AmpR和TetR基因
C. 用含氨苄青霉素的培养基筛选出含重组质粒的受体菌
D. 同时用三种限制酶处理图中质粒,电泳后可得到4个条带
5. 科学家将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ导入杨树细胞,培育成了抗虫杨树。下图表示含目的基因的DNA分子和农杆菌质粒,图中AmpR表示氨苄青霉素抗性基因,NeoR表示新霉素抗性基因,箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的酶切位点。下列叙述不正确的是( )
A. 目的基因插入到质粒的T-DNA上,才能整合到受体细胞染色体中
B. 为使目的基因与质粒高效重组,最好选用EcoRⅠ和PstⅠ
C. 成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗新霉素
D. 可用PCR等技术或抗原—抗体杂交技术检测目的基因是否表达
(2022·扬州市高三期中)
6. 实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是( )
A. 做RT-PCR之前,需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针
B. 若检测结果有强烈荧光信号发出,说明被检测者没有感染病毒
C. RNA不能作为PCR扩增的模板,故需要将样本中的RNA反转录为DNA后再进行扩增
D. 病毒的检测还可以检测病毒引发产生的抗体,其原理是抗原-抗体杂交
7. 一种双链DNA分子被三种不同的限制酶切割,切割产物通过电泳分离,用大小已知的DNA片段的电泳结果作为分子量标记(右图左边一列)。关于该双链DNA,下列说法错误的是( )
A. 呈环状结构
B. 分子质量大小为10kb
C. 有一个NotI和两个EcoRI切点
D. 其NotI切点与EcoRI切点的最短距离为2kb
8. 科学家将苏云金杆菌中的Bt抗虫蛋白基因(抗虫基因)导入棉花的愈伤组织细胞,鉴定后,将含抗虫基因的受体细胞组织培养获得棉花植株。经棉铃虫饲喂实验,发现棉花植株并无抗虫性状,科学家提取棉花叶片细胞中的有关成分进行了如下操作,下列分析错误的是( )
A. 提取细胞中的蛋白质,采用抗原—抗体杂交技术进行检测,若能检测到Bt抗虫蛋白,则可能是抗虫基因表达效率低
B. 若经A检测确定细胞中无Bt抗虫蛋白,可采用核酸分子杂交技术检测细胞中的RNA,若测到Bt抗虫蛋白的mRNA,则可能是抗虫基因能转录,但不能正常翻译
C. 若经B检测确定细胞中无Bt抗虫蛋白的mRNA,可采用核酸分子杂交技术检测细胞中的DNA,若能检测到抗虫基因,则可能是抗虫基因反向插入载体DNA分子中
D. 若经C检测确定细胞中无抗虫基因,则可能只是载体DNA分子导入受体细胞
9. 荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量,其原理是:在PCR反应体系中加入引物的同时,加入与某条模板链互补的荧光探针,当TaqDNA聚合酶