内容正文:
专题10 基因工程
年份
分值
题号
考查知识点
概念理解
素养体现
2021
14
13、23
基因工程
概念5 基因工程赋予生物新的遗传特性
生命观念:熟悉DNA重组技术的基本工具及其作用、特点;
科学思维:能简述基因工程基本操作程序,以及各步骤的一般方法、原理,构建出操作流程图;
科学探究:能够分析重组技术相关实验的设计、操作及结果;利用PCR技术扩增DNA片段并电泳鉴定,或通过软件虚拟PCR实验;通过DNA与其他的化学物质的物理、化学性质的不同,提出提取DNA与纯化DNA的思路,并设计出可行性的实验方案
2022
14
6、24
基因工程
2023
12
22
基因工程
单选题部分
1.(2022江苏卷•6)采用基因工程技术调控植物激素代谢,可实现作物改良。下列相关叙述不合理的是( )
A. 用特异启动子诱导表达iaaM(生长素合成基因)可获得无子果实
B. 大量表达ip(细胞分裂素合成关键基因)可抑制芽的分化
C. 提高ga2ox(氧化赤霉素的酶基因)的表达水平可获得矮化品种
D. 在果实中表达acs(乙烯合成关键酶基因)的反义基因可延迟果实成熟
2、(2021江苏卷•13)下图是剔除转基因植物中标记基因的一种策略,下列相关叙述错误的是( )
A. 分别带有目的基因和标记基因的两个质粒,都带有T-DNA序列
B. 该方法建立在高转化频率基础上,标记基因和目的基因须转到不同染色体上
C. 若要获得除标记基因的植株,转化植株必须经过有性繁殖阶段遗传重组
D. 获得的无筛选标记转基因植株发生了染色体结构变异
非选择题
3、(2021高考•23)某小组为研究真菌基因m的功能,构建了融合表达蛋白M和tag标签的质粒,请结合实验流程回答下列问题:
(1)目的基因的扩增
①提取真菌细胞______,经逆转录获得cDNA,进一步获得基因m片段。
②为了获得融合tag标签的蛋白M,设计引物P2时,不能包含基因m终止密码子的编码序列,否则将导致______。
③热启动PCR可提高扩增效率,方法之一是:先将除TaqDNA聚合酶(Taq酶)以外的各成分混合后,加热到80℃以上再混入酶,然后直接从94℃开始PCR扩增,下列叙述正确的有______
A.Taq酶最适催化温度范围为50~60℃
B.与常规PCR相比,热启动PCR可减少反应起始时引物错配形成的产物
C.两条子链的合成一定都是从5′端向3′端延伸
D.PCR产物DNA碱基序列的特异性体现了Taq酶的特异性
(2)重组质粒的构建
①将Sma I切开的载体A与添加同源序列的m混合,用特定DNA酶处理形成黏性末端,然后降温以促进______,形成A-m结合体。将A-m结合体导入大肠杆菌,利用大肠杆菌中的DNA聚合酶及______酶等,完成质粒的环化。
②若正确构建的重组质粒A—m仍能被Sma I切开,则Sma I的酶切位点可能在______。
(3)融合蛋白的表达
①用含有尿嘧啶的培养基培养URA3基因缺失型酵母,将其作为受体菌,导入质粒A-m,然后涂布于无尿嘧啶的培养基上,筛选获得目的菌株,其机理是______。
②若通过抗原一抗体杂交实验检测到酵母蛋白中含tag标签,说明______,后续实验可借助tag标签进行蛋白M的分离纯化。
4、(2022高考•24)纤毛是广泛存在的细胞表面结构,功能异常可引起多种疾病。因此,研究纤毛形成的作用机制具有重要意义。请回答下列问题。
(1)纤毛结构如图1所示,由细胞膜延伸形成的纤毛膜主要由中心体转变而来,中心体在有丝分裂中的功能是__________________。
(2)某病人肾小管上皮细胞纤毛异常,为了分析纤毛相关基因X是否发生了变异,对基因X进行了PCR扩增与产物测序。从细胞样品中分离DNA时,可通过交替调节盐浓度将与核蛋白结合DNA分离出来,溶液中添加NaC1至2.0mo1/L的目的是__________________。PCR扩增时,需在__________________催化下,在引物__________________端进行DNA链的延伸,获得扩增产物用于测序。
(3)为研究蛋白质X在细胞中的定位,构建绿色荧光蛋白GFP与X的融合蛋白,融合蛋白具有绿色荧光,可示其在细胞内位置。将X-GFP基因融合片段M导入如图Ⅱ所示载体质粒Y,构建Y-M重组质粒(在EcoRⅤ位点插入片段)。请完成下表。
分步实验目标
简易操作、结果、分析
PCR鉴定正向重组质粒Y-M(图Ⅱ中融合片段M中有白色的箭头,代表方向)
①选择图Ⅱ引物_____________;
②PCR目的产物约为_____________bp。
确保M及连接处序列正确,Y-M的连接处上游含有Hind II