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能力评价基因工程及生物技术的安全性与伦理问题(第3讲第2课时)
)A级一综合融会练
1.科学家将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因P-Ⅱ导入杨树细胞,培育成了抗虫杨树。下
图表示含目的基因的DNA分子和农杆菌质粒,图中AmpR表示氨苄青霉素抗性基因,NoR
表示新霉素抗性基因,箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的酶切位点。下列叙述不正
确的是()
BamH I
Th1111
EeoR I
Th111 I BamH I EcoR I
复制原点
a
Neo'目
Pst I
EcoR I Pin-II Pst I
A.目的基因插入到质粒的TDNA上,才能整合到受体细胞染色体中
B.为使目的基因与质粒高效重组,最好选用EcoR I和P对I
C.成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗新霉素
D.可用P℃R等技术或抗原一抗体杂交技术检测日的基因是否“指导”特定蛋白质的合
成
解析:选D农杆菌中的Ti质粒上的TDNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞
染色体的DNA上,根据这一特,点,将目的基因插入到质粒的TDNA上,才能整合到受体细
胞染色体中,A正确:为使目的基因与质粒高效重组,应选用EcRI和Pt|,而切割质粒
时,氨苄青霉素抗性基因被破坏,故成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗
新露素,B、C正确:检测日的基因是否成功产生相应蛋白质,可用抗原一抗体杂交技术,D
错误。
2.(2023重庆模拟)限制酶的发现为DNA的切割和功能基因的获得创造了条件。限制酶
Sau3AI、EcoR I、BamH I的识别序列及切割位点分别为'GATC、G'AATTC、C'
GATCC。含某目的基因的DNA片段如图所示,若利用质粒A(含限制酶Sa3AI、EcoR I、
BamH I的酶切位点各1个)构建基因表达载体,为克服目的基因和质粒A的自身环化以及目
的基因与质粒的任意连接等。下列对限制酶的选择,正确的是()
BamH I
BamH I
Sau3A I |EcoR I Sau3A I EcoR I
目的基因■
A.用限制酶EcoR I或BamH I处理含某目的基因的DNA和质粒A
B.用限制酶Sa3AI和BamH I处理含某目的基因的DNA和质粒A
C.用限制酶Sa3AI和EcoR I处理含某月的基因的DNA和质粒A
D.用限制酶EcoR I和BamH I处理含某目的基因的DNA和质粒A
解析:选D用限制酶Sa3AI切割目的基因会破坏目的基因,质粒含有限制酶ECoR
I、BamH I的酶切位点,获取日的基因也可以用限制酶EcoR I、BamH I进行切割,但
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为了防止目的基因或质粒自身环化以及目的基因与质粒的反向连接,需要使用不同种限制酶
进行切割,则可以使用限制酶EcoR I和BamH I切割质粒和目的基因。
3.图甲、乙中标注了相关限制酶的酶切位点。下列关于培有转基因大肠杆菌的叙述错
误的是()
四环素抗性基因
BamH I、
BamH I引物甲
Hiad围
Bel I
生☑
质粒
-Hind I
BlI/引物丙引物乙Sam3A1
氨苄青霉素日的基因
启动子
抗性基因
为
乙
A.若通过PCR获取该目的基因,应该选用引物甲和引物丙
B.图中质粒和月的基因构建表达载体,应选用BclI和Hind III剪切
C.若将基因表达载体导入受体细胞中,可选用C2+处理法
D.在受体细胞中,氨苄青霉素抗性基因和目的基因可同时表达
解析:选D通过PCR获取日的基因时,两种引物分别和目的基因的两条单链结合,
并沿相反的方向合成子链,故选用引物甲和引物丙,A正确:由甲图可知,选用BamH I会
破坏两种抗性基因,结合乙图可确定应选择BlI和Hind Ml剪切,B正确:将目的基因导入
大肠杆南常采用Ca+处理法,C正确:构建重组质粒时目的基因橘入氨苄青霉素抗性基因
中,故气苄青霉素抗性基因被破坏不能表达,D错误。
4.(223·北京东城区二模)为了获得抗蚜虫棉花新品种,研究人员将雪花莲凝集素基因
(GNA)和尾穗苋凝集素基因(ACA)与载体(即BI121)结合,然后导入棉花细胞。下列操作与实验
目的不符的是()
Kpn I BsaBI BsaB I Xho I Kpn I
卡那霉素
GNA
抗性基因
ACA
pB1121
GNA
JACA
启动子
Kpn I Xho IKpn I
Kpn'I Xho I
重组载体
A.用限制酶BsaB I和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因
B.与只用KpnI相比,pnI和XoI