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课时跟踪检测(四十一)
基因工程
1.某实验小组利用转基因技术培育耐盐水稻,如图1表示含有耐盐基因的外源DNA
分子,图2表示质粒,其上含有BamH I、SmaI和Hindl川三种限制酶的酶切位点。请回
答下列问题:
BamH I
四环素
Sma I
抗性基因
耐盐基因
外源
复制
二DNA
HindⅢ
原点
BamH I Sma I Hind
氨苄青霉
素抗性基因
图1
图2
()分析上图可知,欲构建重组DNA分子,应选用
两种限制酶切割质
粒和外源DNA分子,使用两种不同的限制酶切割含目的基因的外源DNA和质粒的优点是
(2)趣(1)中不使用另外一种限制酶切割的原因是
题(1)中构建成功
的重组质粒若用该酶切割能产生
种不同的DNA片段。
(3)质粒中抗性基因的作用是
成功导入了目的基因的受体细胞(受
体细胞本身不含四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因,不能在含
(填“氨卡青霉素”
或“四环素”)的培养基中进行培养。
(④)从个体水平上鉴定时盐基因是否成功表达的方法是
解析:(①外源DNA和质粒上都含有限制酶BamH I、HindM和SmaI的识别序列和切
割位点,但限制酶Sm阳I的识别序列位于目的基因中,因此构建基因表达载体时,应该选
用限制酶BamH I和Hindl川切割质粒和外源DNA分子:使用两种不同的限制酶切割含目的
基因的外源DNA和质粒可防止质粒和目的基因的自身环化及质粒与目的基因的反向连接。
(2)构建成功的重组质粒含有3个限制酶Sm丨的识别序列和切割位点,因此若用该酶切割
构建成功的重组质粒能产生3种不同的DNA片段。(③)质粒中抗性基因的作用是筛选和鉴定
目的基因:构建基因表达载体时,四环素抗性基因被破坏,但氨苄青霉素抗性基因没有被
破坏,因此成功导入了日的基因的受体细胞(受体细胞本身不含四环素抗性基因和氨苄青霉
素抗性基因),不能在含四环素的培养基中进行培养。(④)从个体水平上鉴定耐盐基因是否成
功表达的方法是将转基因水稻置于盐碱地中培育(或用一定浓度的盐水浇灌转基因水榈,观
察其能否正常生长。
答案:(1)BamH I和HindⅢ防止质粒和目的基因的自身环化及质粒与目的基因的反
向连接(2)Sma1会破坏月目的基因3(3)箭选和鉴定目的基因四环素(④)将转基因水
,独家授权侵权必究·
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稻置于盐碱地中培育(或用一定浓度的盐水浇灌转基因水搁,观察其能否正常生长
2.已知生物体内有一种蛋白质P),该蛋白质是一种转运蛋白,由305个气基酸组成。
如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸,240位的谷氨酰胶变成苯丙氨酸,改变后的蛋
白质P)不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性。回答下列问题:
(①)从上述资料可知,若要改变蛋白质的功能,可以考虑对蛋白质的
进行改造。
(2)以P基因序列为基础,获得P1基因的途径有修饰
基因或合成
基因,所获得的基因表达时遵循中心法则,中心法则的全部内容包括
的复制,以
及遗传信息在不同分子之间的流动,即:
0
③)蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过
和
,进而确定相对应的脱氧核苷酸序列,据此获得基因,
再经表达、纯化获得蛋白质,之后还需要对蛋白质的生物
进行鉴定。
解析:(1)根据题干资料可知,将P分子中158位的丝气酸变成亮氦酸,240位的谷氨
酰胺变成苯丙氨酸后,该蛋白质的功能发生了改变,此过程是通过对构成蛋白质的氨基酸
的排列顺序进行改造,从而改变了蛋白质的结构,进而改变了蛋白质的功能。(2)在蛋白质
工程中,目的基因可以以P基因序列为基础,对生物体内原有P基因进行修饰,也可以通
过人工合成法合成新的P1基因。中心法则的内容如下图所示:
(③)蛋白质工程的基本途径是预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氦
基酸序列→合成DNA→表达出蛋白质,经过该过程得到的蛋白质,需要对其生物功能进行
鉴定,以保证其发挥正常作用。
答案:(1)氨基酸序列或结构(其他答案合理也可)(2)PP1DNA和RNA(或遗传物
质)DNA→RNA、RNA→DNA、RNA→蛋白质(或转录、逆转录、翻的(3)设计蛋白质的
结构推测氨基酸序列功能
3.(2023襄阳期)某植物抗虫基因转录的mRNA下游序列已知,但其上游序列未知。
现利用PCR技术扩增该基因,简要流程如图所示,其中①~③表示有关过程,「~川表示
有关物质。请回答下列问题:
未知序列mRNA已知序列
①
引物1
)I
②加入末端转移酶
AAA(A)
=Ⅱ
TTT(T)
③PCR