2023届高三生物一轮复习导学案重组DNA技术的基本工具

邵阳一中朱开明13707032128 选择性必修三第3章重组DNA技术的基本工具 一、你从教材上找到的关键性语句： (一)、基因工程的概念 1.基因工程的概念 操作环境 操作对象 基因 操作水平 操作原理 操作结果 按照人类的需要 改造生物的遗传特性 2.基因重组的类型 (1)真核生物有性生殖过程中，减数分裂时发生的基因重组：① ② (2)肺炎链球菌的转化实验中发生的基因重组。 (3)基因工程中人工操作导致的基因重组。 3.几乎所有生物的DNA分子都是由 形成的规则的 结构。 4.所有生物都共用一套 5.目的基因可在受体细胞内独立表达的原因是 是控制生物性状的结构和功能单位，具 有」 (二)、分子手术刀一限制性内切核酸酶 1.全称和简称 全称： 简称： 2.来源：主要是从 中分离纯化出来的 3.作用： ①能够识别 DNA分子的某种 ②使 链中 的 断开。 4.作用部位： 5.识别序列：大多数限制酶的识别序列由个核苷酸组成，也有少数限制酶的识别序列由 一个、个或 的核苷酸组成。 6.切割结果：DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式 (1)EcoR I限制酶切割 EcoR I识别序列为GAATTC EcoR I切割部位为之间的磷酸二酯键 C T TA AG (2)SmaI限制酶切割 d o.cc.d SmaI识别序列为CCCGGG SmaI切割部位为之间的磷酸二酯键 (三)、分子缝合针一DNA连接酶 1.功能：将 恢复被限制酶切开的 2.分类和对比 种类 E·coli DNA连接酶 TDNA连接 来源 T:噬菌体 特点 只缝合 末端 缝合 末端 末端 作用恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的 (四)、分子运输车一一载体 1.种类：质粒、 动植物病毒等。 2.常用载体—一质粒 (1)本质：质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之 外，并具有 能力的环状双链DNA分子。 (2)质粒作为载体所具备的条件及原因 条件 原因 选修三第3章重组DNA技术的基本工具一一轮 邵阳一中朱开明13707032128 稳定存在并能 能使目的基因稳定存在且数量可扩增 有一个至多个 位点 可携带多个或多种外源基因 具有特殊的 便于重组DNA分子的 无毒害作用 对受体细胞无毒害作用，避免受体细胞受到损伤 (3)作用 ①作为运输工具，将外源基因导入 ②质粒携带 在细胞内大量复制 (五)探究.实践：DNM的粗提取与鉴定 1.提取思路：利用DNA与NA、蛋白质和脂质等在 性质方面存在的差异，选用 适当的物理或化学方法对他们进行提取。 2.提取原理： ①DNA不溶于 ,但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理，可以初步分离DN与蛋白质： ②DNA在」 中的溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液。 3.鉴定原理：在一定温度下（沸水浴），DNA遇 会呈现蓝色，因此 可以作为鉴定DNA的试剂。 4.比较DNA在不同浓度的NaCL溶液中溶解度不同 溶解规律 2mol/LNaC1溶液0.14mol/LNaC1溶液 DNA溶解度 DNA 00.14mol/LNaC1浓度 5.DNA粗提取中的注意事项 (1)本实验不能用哺乳动物成熟的红细胞作实验材料，原因是 无细 胞核（无DNA)。可选用鸡血细胞作材料。 (2)加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫。加入 和用玻璃棒 搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成 (3)二苯胺试剂要 否则会影响鉴定的效果。 (4)提取植物细胞的DNA时，加入的 有利于DNA的释放；加入食盐 (主要成分是NaC1)的日的是溶解DNA。 (5)在DNA进一步提纯时，选用 的作用是溶解杂质和析出DNA。 二、判断训练： 1.一种生物的基因能“嫁接”到另一种生物的DNA上，是因为生物界的主要遗传物质是 DNA,且它们有共同的结构基础( 2. 外源（目的）基因在受体细胞内得以表达的主要原因是生物界共用一套遗传密码( 3. 基因工程有种的突出优点是能定向改造生物的性状，目的性强( 4. 因为DNA连接酶对所催化连接的DNA分子片段的碱基序列无特异性要求，所以其无专 性() 5. 解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、限制性内切酶都能作用于DNA分子，它们的作用部 位都是相同的。() 6. 用相同的限制性内切酶切割DNA留下的黏性末端是一定相同的：用不同的限制性内切酶 切割DNA留下的黏性末端一定是不相同的。() 7.DNA连接酶与DNA聚合酶都是催化磷酸二酯键的形成，但前者只催化游离脱氧核苷酸连 接到已有脱氧核苷酸链上，后者催化两个DNA片段的连接。() 8. 质粒作为“分子运输车”的条件是①能够自我复制②双链环状DNA分子③有多个限制 酶切点④有标记基因⑤真核细胞中没有