内容正文:
课程导入
怎样培养出具0有抗虫性状的抗虫棉呢?
我国是棉花的生产和消费大国,棉花在种植过程中常常会受到棉铃虫的侵袭,这会使棉花大量减产。大量施用农药不仅提高了生产成本,还可能造成农产品和环境的污染,如果能培育出自身能抵抗棉铃虫的棉花就能解决这个问题。
棉花本身不具有“杀虫基因”,而苏云金杆菌有一种“杀虫基因”,它能通过编码产生抗虫蛋白来杀死棉铃虫。
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是指按照人们的愿望,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看,由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术。
基因工程
第三章|第一节
重组DNA技术的基本工具
第一课时
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番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭,当番木瓜被这种病毒感染后,产量会大大下降。科学家通过精心设计,用“分子工具”培育出了转基因番木瓜,它可以抵御番木瓜环斑病毒DNA双螺旋的直径只有2 nm,对如此微小的分子进行操作,是一项非常精细的工作,更需要专门的“分子工具”。那么,科学家究竟用到了哪些“分子工具”?这些 “分子工具”各具有什么特征呢?
环斑病毒的
非转基因木瓜
转基因木瓜
课程导入
“分子运输车”
“分子手术刀”
“分子缝合针”
“工欲善其事必先利其器”
目
录
CONTENT
限制性核酸内切酶--“分子手术刀”
01
DNA连接酶--“分子缝合针”
02
基因进入受体细胞的载体--“分子运输车”
03
知识点 01
限制性核酸内切酶
--“分子手术刀
重组DNA技术的基本工具
限制性核酸内切酶 --“分子手术刀
主要是原核生物
来源
1. 识别双链DNA分子
形成黏性末端或平末端
2. 断开磷酸二酯键
A
脱氧
核糖
P
O
C
脱氧
核糖
P
O
T
脱氧
核糖
P
O
G
脱氧
核糖
P
O
T
脱氧
核糖
P
O
A
脱氧
核糖
P
O
G
脱氧
核糖
P
O
C
脱氧
核糖
P
O
5’
3’
5’
3’
作用
结果
限制性核酸内切酶 --“分子手术刀
大肠杆菌(E.coli)的EcoRⅠ限制酶能特异性识别__________序列,并切割___和___之间的____________。切割后产生__________。
GAATTC
G
A
磷酸二酯键
黏性末端
EcoRI 限制酶
A
G
T
C
A
T
T
C
G
A
T
A
G
G
A
T
C
A
T
C
A
T
A
T
限制酶
限制性核酸内切酶 --“分子手术刀
SmaI 限制酶只能识别 序列,切割 和 之间的 切开,切割后产生 。
SmaI 限制酶
CCCGGG
C
G
磷酸二酯键
平末端
C
C
C
G
G
G
G
G
G
C
C
C
G
G
G
C
C
C
C
C
C
G
G
G
限制酶
限制性核酸内切酶 --“分子手术刀
1. 你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗?
破坏外源DNA,保护自我
2.为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA?
缺乏特定的核苷酸序列
【思考】
知识点 02
限制性核酸内切酶
--“分子手术刀
重组DNA技术的基本工具
DNA连接酶--“分子缝合针”
DNA连接酶--“分子缝合针”
把切下来的DNA片段拼接成新的DNA,即将 和 连接起来催化形成 。
脱氧核糖
磷酸
磷酸二酯键
DNA连接酶--“分子缝合针”
EcoRI DNA连接酶
A
G
T
C
A
T
T
C
G
A
T
A
可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来;两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来。
T
C
G
A
T
C
注意:
DNA连接酶可连接双链DNA中的DNA单链缺口,但不能将单个脱氧核苷酸连接到DNA链上!
DNA连接酶--“分子缝合针”
T4 DNA连接酶
还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来,但效率较低
C
C
C
G
G
G
G
G
G
C
C
C
DNA连接酶--“分子缝合针”
【小结】
E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶的区别
类型
来源
功能
相同点
差别
E·coli DNA连接酶
T4DNA连接酶
大肠杆菌
粘质沙雷氏菌
恢复
磷酸二酯键
只能连接黏性末端
能连接黏性末端和
平末端(效率较低)
DNA连接酶--“分子缝合针”
【小结】
DNA连接酶与DNA聚合酶的比较
DNA连接酶 DNA聚合酶
相同点 作用实质
化学本质
不
同
点 模板
作用对象
作用结果
用途
都能催化形成磷酸二酯键
都是蛋白质
不需要
需要
形成完整的重组DNA分子
形成DNA的一条链