内容正文:
第二十章 基因工程
第一节 基因工程的综合
◆基因工程的基本工具
1.(2023湖北,4,2分)用氨苄青霉素抗性基
因(AmpR)、四环素抗性基因(TetR)作为标
记基因构建的质粒如图所示.用含有目的
基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后
的质粒,构建基因表达载体(重组质粒),并
转化到受体菌中.下列叙述错误的是
( )
A.若用HindⅢ酶切,目的基因转录的产物
可能不同
B.若用PvuⅠ酶切,在含Tet(四环素)培养
基中的菌落,不一定含有目的基因
C.若用SphⅠ酶切,可通过DNA凝胶电泳
技术鉴定重组质粒构建成功与否
D.若用SphⅠ酶切,携带目的基因的受体
菌在含Amp(氨苄青霉素)和Tet的培养
基中能形成菌落
2.(2023新课标,6,6分)某同学拟用限制酶
(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工
具,将目的基因(两端含相应限制酶的识别
序列和切割位点)和质粒进行切割、连接,以
构建重组表达载体.限制酶的切割位点如
图所示.
下列重组表达载体构建方案合理且效率最
高的是 ( )
A.质 粒 和 目 的 基 因 都 用 酶 3 切 割,用
E.coliDNA连接酶连接
B.质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割,
用T4DNA连接酶连接
C.质粒和目的基因都用酶1和酶2切割,用
T4DNA连接酶连接
D.质粒和目的基因都用酶2和酶4切割,用
E.coliDNA连接酶连接
3.(2020浙江7月,24,2分)下列关于基因
工程的叙述,正确的是 ( )
A.若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用
到的限制性核酸内切酶,则一定有利于
该重组质粒进入受体并保持结构稳定
B.抗除草剂基因转入某抗盐植物获得2个
稳定遗传转基因品系,抗性鉴定为抗除
草剂抗盐和抗除草剂不抗盐.表明一定
是抗盐性的改变与抗除草剂基因的转入
无关
C.抗除草剂基因转入某植物获得转基因植
株,其DNA检测均含目的基因,抗性鉴
定为抗除草剂和不抗除草剂.表明一定
是前者表达了抗盐性蛋白而后者只表达
抗性基因RNA
D.已知不同分子量DNA可分开成不同条
带,相同分子量的为一条带.用某种限
制性核酸内切酶完全酶切环状质粒后,
出现3条带.表明该质粒上一定至少有
3个被该酶切开的位置
[注:“限制性核酸内切酶”在新教材中表述
为“限制性内切核酸酶”]
4.(2023湖北,22(4),3分)某病毒对动物养
殖业危害十分严重.我国学者拟以该病毒
外壳蛋白 A为抗原来制备单克隆抗体,以
期快速检测该病毒,其主要技术路线如图
所示.
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五年真题分类特训生物
回答下列问题:
(4)构建重组质粒需要使用DNA连接酶.
下列属于DNA连接酶底物的是
.
5.(2021全国乙,38,15分)用DNA重组技
术可以赋予生物以新的遗传特性,创造出更
符合人类需要的生物产品.在此过程中需
要使用多种工具酶,其中4种限制性核酸内
切酶的切割位点如图所示.
↓ ↓ ↓ ↓
GAATTC CCCGGG CTGCAG GATATC
CTTAAG GGGCCC GACGTC CTATAG
↑ ↑ ↑ ↑
限制酶:
EcoRⅠ SmaⅠ PstⅠ EcoRⅤ
回答下列问题:
(1)常用的DNA连接酶有E.coliDNA连
接酶和 T4DNA连接酶.上图中
酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA
连接酶连接.上图中
酶 切 割 后 的 DNA 片 段 可 以 用
T4DNA连接酶连接.
(2)DNA连接酶催化目的基因片段与质粒
载体片段之间形成的化学键是
.
(3)DNA重组技术中所用的质粒载体具有
一些特征.如质粒DNA分子上有复制原点,
可以保证质粒在受体细胞中能 ;质粒
DNA分子上有 ,
便于外源DNA插入;质粒DNA分子上有
标记基因(如某种抗生素抗性基因),利用抗
生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞,方法
是
.
(4)表达载体含有启动子,启动子是指