内容正文:
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第3讲 DNA的
复制及基因的本质
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第六单元 基因的本质与表达
1953年沃森和克里克撰写的《核酸的分子结构—脱氧核糖核酸的一个结构模型》论文发表在英国《自然》杂志上。
温故知新
沃森和克里克 核酸的分子结构
值得注意的是,我们提出的这种碱基特异性配对方式,暗示着遗传物质进行复制的一种可能机制。
复制机制可能是怎样的?
问题探讨
3
一.对DNA复制的推测
5’
3’
5’
3’
3’
5’
5’
3’
双螺旋解开
氢键断裂
①DNA复制时,DNA双螺旋解开,互补的碱基之间的氢键断裂;
沃森和克里克提出的遗传物质自我复制假说:
一.对DNA复制的推测
4
②解开的两条单链分别作为复制的模板,游离的脱氧核苷酸依据碱基互补配对原则,通过形成氢键,结合到作为模板的单链上;
3’
5’
5’
3’
模板
模板
子链
子链
一.对DNA复制的推测
5
③新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的一条链,这种复制方式被称做半保留复制。
3’
5’
5’
3’
模板
模板
子链
子链
原来的
原来的
新的
新的
一.对DNA复制的推测
6
5’
3’
5’
3’
5’
3’
3’
5’
3’
5’
5’
3’
半保留复制
+
应该是
全保留复制
一.对DNA复制的推测
7
5’
3’
5’
3’
全保留复制
5’
3’
5’
3’
+
5’
3’
5’
3’
都是新链
应该是
半保留复制
一.对DNA复制的推测
8
半保留
复制
全保留
复制
需要通过实验验证
首要问题,如何区分开亲代与子代的DNA?
梅塞尔森
斯塔尔
1958年
大肠杆菌
同位素标记技术
密度梯度离心技术
二.DNA半保留复制的实验证据
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背景知识:
①15N和14N是氮元素的两种稳定同位素,这两种同位素的相对原子质量不同,含15N的DNA比含14N的DNA密度大;
②利用离心技术可以在试管中区分含有不同氮元素的DNA;
14N/14N—DNA
15N/14N—DNA
15N/15N—DNA
轻带
中带
重带
二.DNA半保留复制的实验证据
15NH4Cl
14N/ 14N
-DNA
繁殖若干代
15N/ 15N
-DNA
目的?
得到的大肠杆菌DNA几乎都是15N标记的
二.DNA半保留复制的实验证据
12
15N/ 15N
-DNA
14NH4Cl
再分裂一次
分裂一次
提取DNA
离心
提取DNA
离心
?
?
?
哪个位置
?
?
?
哪个位置
二.DNA半保留复制的实验证据
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半保留复制
分裂一次
再分裂一次
15N/ 15N
-DNA
15N/ 14N
-DNA
15N/ 14N
-DNA
15N/ 14N
-DNA
15N/ 14N
-DNA
14N/ 14N
-DNA
14N/ 14N
-DNA
14N
14N
14N
+
+
重带
中带
轻带
中带
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全保留复制
分裂一次
再分裂一次
15N/ 15N
-DNA
15N/ 15N
-DNA
14N/ 14N
-DNA
14N / 14N
-DNA
15N/ 15N
-DNA
14N/ 14N
-DNA
14N/ 14N
-DNA
14N
14N
14N
+
+
重带
重带
轻带
重带
轻带
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实验结果与半保留复制结果一致
DNA的复制是以半保留的方式进行的
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作出假说
演绎推理
实验验证
2、推测可能的复制方式
3、推理、探究几种复制模式下得到子代DNA的可能情况,预测可能实验结果
5、结论:DNA复制是半保留复制
1、DNA的是如何复制的?
提出问题
半保留复制
全保留复制
假说——演绎法
4、证明DNA半保留复制的实验
得出结论
DNA复制方式的探究历程
15N/ 15N
-DNA
15N/ 14N
-DNA
15N/ 14N
-DNA
半保留复制
有丝分裂的间期和减数第一次分裂前的间期
2、时间:
3、场所:
真核生物:
1、概念:
指以亲代DNA的两条链为模板合成子代DNA的过程。
叶绿体、线粒体
原核生物:
细胞核(主要)
拟核、细胞质(质粒)
三.DNA复制的过程
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1)解旋
在能量的驱动下,解旋酶将DNA双螺旋的两条链解开,氢键断裂。
解旋酶
ATP
4、过程:
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2)合成引物(补充)
在引物酶的作用下,产生一小段RNA作为引物,后期引物会被切除
引物酶
引物
5’
3’
引物的作用简单理解就是引出DNA聚合酶,因为DNA聚合酶必须识别3’端才能结合上去。
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3)合成子链
DNA聚合酶等以解开的每一条母链为模板,以游离的4种脱氧核苷酸为原料,按照碱基互补配对原则,各自合成与母链互补的一条子链。
模板
模板
DNA聚合酶
5’
3’
子链延伸方向
子链延伸方向
两条子链延伸方向相反,但都是从