内容正文:
基因工程
晨萱
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1
目录
CONTENTS
01
基因工程的基本工具
02
基因工程的基本操作程序
03
基因工程的应用
04
蛋白质工程的原理和应用
晨萱
2
基础过关
DNA的结构、复制、表达
真原核基因结构
基因突变、基因重组
胚胎工程
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基础过关
一、基因工程的发展历程
1.分子遗传学方面
2.微生物学方面
3.生物化学方面
4.其他
肺炎双球菌的转化实验→DNA可以在同种生物不同个体间转移
DNA双螺旋结构及自我复制假说的提出
DNA半保留复制的证明及中心法则的提出
限制酶、DNA连接酶和逆转录酶的发现
→为DNA切割、连接及功能基因的获得创造了条件
细菌中的质粒→可以自我复制,并在细菌细胞间转移
农杆菌转化法成功培育转基因烟草
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基础过关
一、基因工程的发展历程
1.分子遗传学方面
2.微生物学方面
3.生物化学方面
4.其他
胰岛素氨基酸序列的测定及密码子的破译
DNA测序方法及DNA合成仪问世
PCR技术→为获取目的基因提供有效手段
高通量测序技术→实现低成本测定大量核酸序列
体外重组DNA分子的成功构建
实现外源基因在原核细胞中成功表达
基因编辑技术→实现对特定基因的定点插入、敲除或替换
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基础过关
二、重组DNA技术的基本工具
1.三种工具的来源、作用特点及作用结果
2.从作用实质、化学本质、是否需模板、作用对象及作用结果角度
比较DNA聚合酶与DNA连接酶
3.作为载体需具备的条件
4.噬菌体或某些动植物病毒作为运载体的原理
5.标记基因的作用
6.DNA粗提取的原理、DNA鉴定的原理
7.DNA粗提取选材的要求、操作步骤及注意事项
8.DNA鉴定的试剂、条件及现象
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重难点突破
【典例1】(1)质粒与拟核中的DNA有哪些相同点:(至少写出两点)
① 。
② 。
③ 。
(2)细胞膜上的载体蛋白与基因工程中的载体的区别
①化学本质不同:细胞膜上的载体: 。
基因工程中的载体可能是物质,如 ;
也可是生物,如 或噬菌体。
②功能不同:细胞膜上的载体功能是 ;
基因工程中的载体是一种“分子运输车”,把 。
化学本质和结构相同
能够自我复制
具有遗传效应或都能够指导蛋白质的合成等
蛋白质
质粒
动植物病毒
控制物质进出细胞
目的基因导入受体细胞
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重难点突破
用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作,若干循环后 序列会明显变 。
该序列能否再被酶a或b识别?
多
否
【典例2】
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基础过关
三、基因工程的基本操作程序
1.基因工程的基本操作程序主要包括哪几个步骤
2.目的基因的概念
3.比较真核生物与原核生物基因结构的区别
4.获取目的基因的方法有哪些
5.Bt基因的全称、来源、其所指导合成的蛋白质及其作用
6.PCR技术的全称、原理、目的、产物的鉴定方法及优点
7.列举PCR反应体系中参与的组分、每循环过程及结果
8.PCR反应缓冲液中一般要添加Mg2+的原因
9.引物是什么?引物的作用是?设计引物的要求是
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基础过关
三、基因工程的基本操作程序
10.琼脂糖凝胶电泳的原理、DNA分子的迁移速率与哪些因素有关
11.基因工程的核心步骤是
12.构建基因表达载体的目的、基因表达载体的组成、及各部分的作用
13.诱导型启动子的作用、比较启动子终止子与起始密码子终止密码子
14.构建表达载体时,用双酶切的优点
15.将目的基因导入受体细胞的方法有哪些
16.转化的概念、农杆菌的特点
17.农杆菌转化法导入受体细胞的步骤(两次拼接两次导入),及根据受体植物的不同,所用的具体转化方法有何区别
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基础过关
三、基因工程的基本操作程序
18.原核生物作为受体细胞产生的真核生物的蛋白质通常没有生物活性,需要在体外进行再加工,为什么
19.目的基因检测与鉴定的目的及方法
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(2)延伸时需要加入两种引物,原因是
。
(1)两种引物与模板链如何配对?