内容正文:
主备人:王艳 审核:高二生物组 时间:2023-6-3 学案编号:05
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核移植和胚胎工程
1、 核移植(克隆)
1.分类:包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植,其中胚胎细胞(分化程度低,表现全能性相对容易)核移植较易成功。
2.原理:动物细胞核具有全能性
3.过程:
4.动物体细胞核移植属于无性生殖。
5.选择MⅡ期的卵母细胞作为受体细胞的原因:
(1)细胞大,易于操作;且卵黄多,营养丰富,为发育提供充足的营养。
(2)卵母细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质。
6.卵母细胞去核(纺锤体染色体复合物)方法:常用显微操作法(会穿透膜和透明带)
此外梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理也可以去核,但不穿透透明带,只是使其中DNA变性。
7.细胞培养一般选用10代以内(原代培养)的细胞,以保证供体细胞正常遗传基础
8.克隆动物性状
(1)克隆动物细胞核基因来自体细胞核供体,因此,克隆动物的性状与体细胞核供体基本相同。
(2)克隆动物的细胞质基因来自供体和卵母细胞,因此,克隆动物的性状与卵母细胞供体部分相同。
(3)代孕母体没有为克隆动物提供遗传物质,因此,克隆动物的性状与代孕母体没有直接关系。
9.重构胚是指人工重新构建的胚胎,具有发育成完成个体的能力。
用物理或化学方法(电刺激、Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育进程
10.动物克隆过程运用到的技术包括:动物细胞核移植、动物细胞培养、动物细胞融合、早期胚胎培养、胚胎移植
11.应用前景
(1)医药卫生领域
①转基因克隆动物作为生物反应器,生产珍贵的医用蛋白。
②转基因克隆动物的细胞、组织和器官可作为异种移植的供体。
③人的核移植胚胎干细胞经诱导分化,形成相应的细胞、组织、器官后,可用于组织器官的移植。
(2)了解胚胎发育及衰老过程。
(3)用克隆动物做疾病模型,使人们更好地追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。
(4)保护濒危物种方面:保护濒危物种,增加濒危动物的存活数量。
存在问题
(1)体细胞核移植技术的成功率非常低。
(2)克隆动物存在健康问题,表现出遗传和生理缺陷等
二、胚胎工程
1.胚胎工程技术包括体外受精、胚胎移植和胚胎分割等。
2.体外受精步骤:卵母细胞的采集、精子的获取和受精。
3.卵母细胞的采集方法:输卵管冲取卵子(可直接受精)、卵巢中取卵(需体外培养至MП期才能受精)
卵子形成过程:第一阶段:胚胎在性别分化后,雌性胎儿卵巢内的卵原细胞通过有丝分裂增加数量,部分卵原细胞经染色体复制和其他物质的合成,演变为初级卵母细胞,形成卵泡。第二阶段:排卵前后完成了减数分裂Ⅰ,产生一个次级卵母细胞和一个第一极体,进入输卵管。第三阶段:减数分裂Ⅱ是在精子与卵子结合的过程中哺乳完成的,次级卵母细胞经分裂产生一个成熟的卵子和第二极体。
4.精子获取:①精液由精子和精浆两部分组成,精浆中含有一种能抑制精子获能的物质,精子获能前进行离心处理,目的是除去精浆以利于精子获能
②精子获能方法:直接利用雌性动物的生殖道使精子获能;
将精子培养在人工配制的获能液中,使其获能等。获能液的成分因动物种类不同有所差异,常见的有肝素,钙离子载体等。
5.受精阶段:受精场所在输卵管
①阻止精子入卵反应:透明带反应、卵细胞膜反应
②受精的标志是观察到两个极体或雌雄原核,而受精完成的标志为雌、雄原核的融合形成合子,即受精卵
6.胚胎早期发育,场所是输卵管和子宫
过程
受精卵
↓
卵裂期
↓
桑葚胚:卵裂产生的子细胞逐渐形成致密的细胞团形似桑葚
↓
囊胚内细胞团仍具有全能性
孵化:囊胚进一步扩大,会导致透明带破裂,胚胎从其中伸展出来
↓
原肠胚:形成外胚层、内胚层和中胚层→各种组织、器官
项目
变化
项目
变化
细胞数目
增多
每个细胞内的DNA总量
不变
每个细胞体积
减小
有机物总量
减少
DNA总量
增多
物质种类
增多
开始出现细胞分化的阶段是囊胚期,细胞分化最显著的阶段是原肠胚的三个胚层分化形成各种组织、器官。细胞分化的原因是细胞内基因的选择性表达。
7.胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内,使之继续发育为新个体的技术
①获得胚胎的方式:体内受精(人工授精)、体外受精、核移植、转基因等
②超数排卵:促性腺激素;同期发情处理:孕激素
③胚胎移植过程