2.2.1动物细胞培养课件2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

阅读教材P43-44： 1.动物细胞培养条件有哪些？ 2.什么是合成培养基？为什么要在培养基中加入血清？ 3.如何保证无菌无毒的环境？为什么要更换培养液？ 阅读教材P44-45： 1.为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？可用什么方法？ 2.体外培养动物细胞有哪些类型？ 3.什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？ 4.什么是原代培养和传代培养？ 5.为什么要进行分瓶培养？怎么处理？ 6.动物细胞培养与植物组织培养有什么相同之处与不同之处？ 阅读教材P46： 1.什么是干细胞？它有哪些类型？这些类型各有什么特点和哪些方面的应用？ 2.科学家是怎么获得iPS细胞的？这种细胞与胚胎干细胞相比，有哪些应用优势？ 第2章 第2节 动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体 动物细胞工程 是最基础的技术 植物细胞工程 植物组织培养 植物体细胞杂交 细胞工程 治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。 通过细胞培养构建的人造皮肤 【从社会中来】 可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增； 动物细胞培养 指动物体中取出相关的组织,将它分散成 ，然后 在 下,让这些细胞 的技术。 动物细胞培养 细胞增殖(有丝分裂) 胚胎或幼龄动物的细胞 获得细胞或者细胞产物 ①原理： ③培养对象： ②目的： 单个细胞 适宜的培养条件 生长和繁殖 1、概念： 思考： 幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较，哪些细胞更易于培养？为什么？ 动物细胞培养的条件 营养条件 其他条件 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 糖类、氨基酸、无机盐、维生素等 2、条件： 幼龄动物的细胞增殖能力强，分裂旺盛，同样分化程度低的细胞，增殖能力越强，容易培养 一 一、动物细胞培养的条件 1. 营养条件： +动物血清等一些天然成分 合成培养基 按化学成分分 （1）培养基构成： 天然培养基 （2）培养基类型： 含有尚未研究清楚的细胞所需的营养物质 液体培养基 （培养液） 将细胞所需的营养物质（糖类、氨基酸、无机盐、维生素等）按种类和所需量严格配制而成的培养基。 这里的糖类一般指葡萄糖，不包括淀粉、蔗糖等 （已知成分） （未知成分） （1）对培养液和所有培养用具进行 处理； （2）在 下进行操作； （3）定期更换培养液 清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 （加入一定量的抗生素） 无菌 无毒 1.无菌、无毒的环境 2. 其他条件： 灭菌 无菌环境 (1)哺乳动物细胞培养的温度多以________________为宜； (2)多数动物细胞生存的适宜pH为____________。 (3)维持适宜渗透压的目的______________________________。 2.温度、pH和渗透压 2. 其他条件： 36.5±0.5℃ 7.2-7.4 维持细胞正常的形态和功能 3.气体环境 （1）气体组成及作用： O2： CO2： 细胞代谢所必需 维持培养液的pH （2）具体操作： 通常采用培养皿或松盖培养瓶。 置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 培养瓶 培养皿 一 二、动物细胞培养的过程 取动物组织 分散成单个细胞 制成细胞悬液 加培养液 原代培养 传代培养 分瓶培养 一 二、动物细胞培养的过程 取动物组织 分散成单个细胞 制成细胞悬液 加培养液 原代培养（10代以内） 传代培养（10-50代） 分瓶培养 用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理 【探讨1】进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 胃蛋白酶的适宜pH约为2，而多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，在此环境中胃蛋白酶会失活。 悬浮生长 贴壁生长 (大多数） 细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等 出现接触抑制 细胞分裂受阻 解决方法 ②制成细胞悬液，分瓶培养 ①收集细胞 悬浮培养的细胞：直接用离心法收集 贴壁细胞：用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集 ①原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。 ②细胞贴壁：某些细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。 ③接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。 ④传代培养：分瓶后的细胞