内容正文:
细胞工程
细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。
原理和方法
操作水平
目的
分类
细胞生物学、分子生物学和发育生物学
细胞器、细胞或组织
获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品
动物细胞工程和植物细胞工程
第2章 细胞工程
第1节 植物细胞工程
一 植物细胞工程的基本技术
1
植物组织培养技术
2
植物体细胞杂交技术
一、植物组织培养技术
2.原理:
1.概念:
指离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工控制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其分化为完整植株的技术。
植物细胞的全能性
外植体
细胞经过分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。
(1)体现全能性的标志:
细胞→ 完整个体或其他各种细胞
判断:胡萝卜韧皮部细胞发育成完整植株;
受精卵发育成个体(动植物);
蜜蜂受精卵发育成工蜂,卵细胞发育成雄峰;
一颗种子萌发成植株;
用一片叶子、一片花瓣、一粒花粉繁殖出新的植株。
植物细胞的全能性
植物细胞的全能性
(2)具有全能性的原因:
一般生物体的每一个细胞都包含有该物种的全套遗传信息。
≠全部基因
(3)生物体内细胞不体现全能性的原因:
基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果。
①植物细胞 > 动物细胞;
(4)全能性大小比较:
③分化程度低的 > 分化程度高的;
②细胞分裂能力强的 > 细胞分裂能力弱的;
④受精卵 > 胚胎干细胞 > 生殖细胞 > 体细胞。
植物细胞的全能性
接种外植体
诱导愈伤组织
诱导生芽
诱导生根
移栽成活
脱分化
再分化
再分化
一、植物组织培养技术
3.一般过程
外植体
愈伤组织
试管苗
完整植株
脱分化
芽、根等
再分化
生长 发育
一、植物组织培养技术
3.一般过程
(1)脱分化:
在一定的激素和营养等条件的诱导下,已经分化的细胞失去其特有的结构和功能,转变成未分化细胞的过程。
①结果:形成愈伤组织;
不定形态的薄壁组织团块,具有较强的分裂和分化能力
②光照条件:
一般不需要光照;
③该过程中只有细胞增殖(有丝分裂),没有细胞分化。
一、植物组织培养技术
3.一般过程
(2)再分化:
脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化出芽或根等器官的过程。
①实质:
基因的选择性表达;
②光照条件:
需要给予适当强度的光照;
原因:诱导叶绿素的合成,使试管苗能够进行光合作用
③该过程中有细胞增殖和细胞分化。
注意:
植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素,其浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向。
生长素/细胞分裂素 结果
比值高(>1)
比值低(<1)
比值适中(=1)
有利于根的分化
有利于芽的分化
促进愈伤组织的形成
1
2
3
4
5
6
菊花的组织培养
探究•实践
1.实验原理
植物细胞一般具有全能性
2.方法步骤
外植体消毒
外植体切割
接种外植体
培养外植体
转移培养
移栽试管苗
方法步骤
②消毒:
30s
2-3次
30min
①材料:
幼嫩的菊花茎段
2-3次
酒精
无菌水
次氯酸钠溶液
无菌水洗
(1)外植体消毒
细胞分裂旺盛,容易诱导其脱分化和再分化
防止培养物被杂菌污染
方法步骤
(3)接种外植体
在酒精灯火焰旁,将外植体的1/3~1/2插入诱导愈伤组织的培养基中。用封口膜或瓶盖封盖瓶口,并在培养瓶上作好标记。
注意:不要倒插
(形态学上端→下端)
方法步骤
(4)培养外植体
将接种了外植体的锥形瓶或植物组织培养瓶置于18~22℃的培养箱中培养。在培养过程中,定期观察和记录愈伤组织的生长情况。
注意:避光培养
方法步骤
(5)转移培养
培养15~20d后,将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上。长出芽后,再将其转接到诱导生根的培养基上,进一步诱导形成试管苗。
注意:①给予适当时间和强度的光照;
②需要转移培养基进行培养。
菊花组织培养
1.A、B过程分别为 。C是 。
A过程细胞分裂方式是 ,
B过程细胞分裂方式是 ,同时也进行