3.3 通过细胞融合可产生具有新特性的细胞课件2022-2023学年高二下学期生物浙科版选择性必修3

3.3 通过细胞融合可产生具有新特性的细胞 中国防疫、战疫的做法展现了中国速度、中国效率和中国战果。 新冠疫情爆发以来，14亿中国人汇聚成群防群控的万里长城，涌现出了无数最美逆行者。 复旦大学附属医院张文宏主任接受采访时谈到新冠特效药研发方向是生物制品单克隆抗体。 一、两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞 1.概念： 使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 2.结果： 形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。 3.原理： 细胞膜具有一定的流动性 4.诱导融合的常用方法： PEG融合法、 电流刺激法、 灭活病毒诱导法。 相关信息 1.“灭活病毒”中灭活的具体含义是什么？ 用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构 2.灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？ 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合 一、两个或多个动物细胞经诱导可融合形成一个细胞 1.概念： 使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 2.结果： 形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。 3.原理： 细胞膜具有一定的流动性 5.意义： 突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 4.诱导融合的常用方法： PEG融合法、 电流刺激法、 灭活病毒诱导法。 6.应用： （1）在染色体基因定位上的应用 （2）为制备单克隆抗体开辟了新途径。 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 细胞融合前的处理方法 诱导细胞融合的方法 细胞融合成功的标志 主要用途 意义 细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性 细胞膜具有一定的流动性 用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞 电融合法、离心法；聚乙二醇（PEG）融合法 PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法 再生出细胞壁 细胞核的融合 获得完整的杂种植株 主要用于制造单克隆抗体 打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种 突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能 2023/6/14 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较 二、细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础 1.早期获得抗体的方法 向动物体内反复注射某种抗原 从动物血清中分离所需抗体 产量低、纯度低、特异性差 缺点： 多克隆抗体 思考： 1.抗体的本质是什么？如何产生的？ 2.用传统的方法如何获取抗体？ 3.此方法能否快速、大量获取我们想要的某种抗体？为什么？ 二、细胞融合技术是制备单克隆抗体的基础 2.单克隆抗体 B淋巴细胞不能无限增殖 克隆单一的B淋巴细胞，得到的细胞群就能分泌出化学性质单一、特异性强的抗体 制备思路： 困难： 若要得到大量的单一抗体，我们该如何去做？ 资料： 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的浆细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个浆细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用克隆单个B淋巴细胞形成细胞群。 米尔斯坦 科勒 由于发明了单克隆抗体的制备技术，米尔斯坦和科勒于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖 大胆设想： B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 （能产生抗体） （能大量增殖） 融合细胞 （既能产生抗体，又能大量增殖） （1）单克隆抗体制备的过程： 2023/6/14 注射特定的抗原 培养骨髓瘤细胞 从脾中提取 B淋巴细胞 多种 骨髓瘤细胞 诱导融合 将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合 能产生抗体，但不能大量增殖 不能产生抗体，但能大量增殖 PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法 目的是获得产生特定抗体的B淋巴细胞 多种杂交细胞： 未融合的细胞 B-骨、 骨-骨、 B-B、 第一次筛选： 用特定的选择培养基 在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长 杂交瘤细胞： （既能迅速大量增殖，又能产生抗体） （能产生所需抗体的杂交瘤细胞） 此杂交瘤细胞包括能分泌所需抗体的细胞和产生其他抗体的细胞。如何筛选？ 阅读教材P82-83课外读 多种杂交细胞： 未融合的细胞 B-骨、 骨-骨、 B-B、 第一次筛选： 用特定的选择培养基 杂交瘤细胞： （既能迅速大量增殖，又能产生抗体） 第二次筛选： 克隆化培养、抗体检测 （可进行多次） 抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞 （分泌的抗体能与特定抗原结合） 每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞 克隆化培养 多孔细胞培养板 （能产生所需抗体的杂交瘤细胞） 在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长 抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞 （分泌的抗体能与特定抗原结合） 注射到小鼠腹腔内 体外培养