内容正文:
第43课时 微生物的培养技术及应用
素养目标
1.掌握选择培养基的原理,理解适者生存的含义。(生命观念)
2.通过分析培养基各成分在微生物培养中的作用,得出可以通过调整培养基的配方,有目的地培养某种微生物的结论。(科学思维)
3.通过微生物的相关实验,学会培养、分离微生物,以及微生物计数的实验设计。(科学探究)
考点一 微生物的基本培养技术
1.培养基的配制
(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质,用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
(2)营养组成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质,此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
(3)种类
①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。
②按功能可分为鉴别培养基和选择培养基。
2.无菌技术
(1)概念:在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
(2)目的:获得纯净的微生物培养物。
(3)常用方法
消毒
灭菌
作用强度及方法
较为温和的物理、化学或生物等方法
强烈的理化方法
作用程度
杀死物体表面或内部一部分微生物
杀死物体内外所有的微生物
芽孢和孢子
一般不能杀灭
能杀灭
适用对象
操作空间、操作者的衣着和双手、活体生物材料
培养器皿、接种用具、培养基等
常用方法
煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药物消毒法、紫外线消毒法
湿热灭菌法、干热灭菌法、灼烧灭菌法
3.微生物的纯培养
(1)概念:由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,获得纯培养物的过程就是纯培养。
(2)过程:包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
(3)常用方法:平板划线法和稀释涂布平板法。
(4)实例——酵母菌的纯培养
1.辨析正误
(1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,有时还需要加入一些特殊的物质。( √ )
(2)消毒的原则是既要杀死材料表面的微生物,又要减少消毒剂对细胞的伤害。( √ )
(3)为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。( × )
提示:接种环经火焰灭菌后应先冷却,以防杀死菌种。
(4)平板划线法中每一次划线后都要将接种环灼烧。( √ )
(5)需要将一个未接种的培养基放在相同的条件下培养,以检验培养基的灭菌是否合格。( √ )
2.教材深挖
(选择性必修3 P12“探究·实践”拓展)为什么需要使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰?平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
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答案:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面湿度也比较高,将平板倒置,既可以防止培养基表面的水分过快地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
1.培养基中营养成分的作用和主要来源
成分
含义
作用
主要来源
碳源
提供碳元素的物质
构成生物体细胞的物质和一些代谢物,有些也是异养生物的能源物质
无机碳源:CO2、NaHCO3等;有机碳源:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油、牛肉膏、蛋白胨等
氮源
提供氮元素的物质
合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢物
无机氮源:N2、NH3、铵盐、硝酸盐等;有机氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨等
无机盐
为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素,包括大量元素和微量元素
是细胞的组成成分、生理调节物质、某些化能自养菌的能源,酶的激活剂等
无机化合物
水
生物体内含量很高的无机物
不仅是优良的溶剂,而且可维持生物大分子结构的稳定
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2.平板划线操作的注意事项
(1)灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。
(2)第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线的末端开始,使微生物的数目随着划线次数的增加而逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
(3)划线时最后一区不要与第一区相连。
(4)划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。
(5)操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行灼烧灭菌,划线操作结束时,仍需灼烧接种环。每次灼烧的目的:
灼烧
目