第十单元 课时跟踪练(47) 基因工程的基本工具与操作程序（Word练习）-【优化指导】2024高考生物一轮复习高中总复习·第1轮（人教不定项版 新教材 新高考）

课时跟踪练(47)　基因工程的基本工具与操作程序 一、单项选择题 1．如图表示由不同的限制酶切割而成的DNA末端及相关的酶作用位点。下列有关叙述错误的是(　　) A．甲、乙、丙都属于黏性末端 B．甲、乙片段可形成重组DNA分子，但甲、丙不能 C．DNA连接酶的作用位点在图乙中b处 D．切割甲的限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子 C　解析：由图可知，甲、乙、丙都属于黏性末端，A正确；甲、乙的黏性末端相同，因此可在DNA连接酶的作用下形成重组DNA分子，但甲、丙的黏性末端不同，它们之间不能形成重组DNA分子，B正确；DNA连接酶将两个DNA片段连接为一个DNA分子，作用部位是磷酸二酯键，C错误；切割甲的限制酶的识别序列为GAATTC∥CTTAAG，而甲、乙片段形成的重组DNA分子序列为GAATTG∥CTTAAC，因此切割甲的限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子，D正确。 2．(2023·山东泰安模拟)限制酶的发现为DNA的切割和功能基因的获得创造了条件。限制酶Sau3A Ⅰ 、EcoR Ⅰ 、BamH Ⅰ 的识别序列及切割位点分别为↓GATC、G↓AATTC、C↓GATCC。含某目的基因的DNA片段如图所示，若利用质粒A(含限制酶Sau3A Ⅰ 、EcoR Ⅰ 、BamH Ⅰ 的酶切位点各1个)构建基因表达载体，为克服目的基因和质粒A的自身环化以及目的基因与质粒的任意连接等，应该如何选择限制酶(　　) A．用限制酶EcoR Ⅰ 或BamH Ⅰ 处理含某目的基因的DNA和质粒A B．用限制酶Sau3A Ⅰ 和BamH Ⅰ 处理含某目的基因的DNA和质粒A C．用限制酶Sau3A Ⅰ 和EcoR Ⅰ 处理含某目的基因的DNA和质粒A D．用限制酶EcoR Ⅰ 和BamH Ⅰ 处理含某目的基因的DNA和质粒A D　解析：用限制酶Sau3A Ⅰ 切割目的基因会破坏目的基因，且为了防止目的基因和质粒自身环化等，需要使用不同种限制酶进行切割，所以应使用限制酶EcoR Ⅰ 和BamH Ⅰ 去切割质粒和目的基因。故选D。 3．若要利用某目的基因(如图甲)和P1噬菌体载体(如图乙)构建重组DNA(如图丙)，限制性内切核酸酶的酶切位点分别是Bgl Ⅱ (A↓GATCT)、EcoR Ⅰ (G↓AATTC)和Sau3A Ⅰ (↓GATC)。下列分析合理的是(　　) A．用EcoR Ⅰ 切割目的基因和P1噬菌体载体 B．用Bgl Ⅱ 和EcoR Ⅰ 切割目的基因和P1噬菌体载体 C．用Bgl Ⅱ 和Sau3A Ⅰ 切割目的基因和P1噬菌体载体 D．用EcoR Ⅰ 和Sau3A Ⅰ 切割目的基因和P1噬菌体载体 D　解析：用EcoR Ⅰ 和Sau3A Ⅰ 切割目的基因和P1噬菌体载体，构建的重组DNA中RNA聚合酶在插入的目的基因上的移动方向与图丙相同。故选D。 4．利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示)。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述错误的是(　　) A．用PCR方法扩增目的基因时无须知道基因的全部序列 B．设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连 C．复性温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物 D．第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例为15/16 D　解析：用PCR方法扩增目的基因时，要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成(两种)引物，但无须知道基因的全部序列，A正确；PCR过程中需要两种引物，不同的引物能靠碱基互补配对形成(部分)双链，从而造成引物不能与模板DNA结合，故设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连，B正确；复性的目的是使两种引物通过碱基互补配对与两条DNA单链结合，因此复性温度过高可能引起两种引物不能与两条DNA单链结合，进而导致PCR反应得不到任何扩增产物，C正确；DNA复制为半保留复制，第四轮循环即DNA复制4次，共形成24＝16个DNA分子，其中含有最初模板链的2个DNA分子含有引物A或引物B，其余14个DNA分子均含有引物A和引物B，所以第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例为14/16＝7/8，D错误。 5．(2023·北京西城一模)如图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息，将两者构建的重组质粒导入受体菌并进行筛选。下列叙述错误的是(　　) A．应选择的限制酶组合是酶F和酶G B．所选用的受体菌不能含有AmpR和TetR基因 C．用含氨苄青霉素的培养基筛选出含重组质粒的受体菌 D．同时用三种限制酶处理图中质粒，电泳后可得到4个条带 C　解析：为避免切割后DNA片段的自身环化，同时保留质粒上的标记基因，切割时应选择的限制酶组合是酶F