内容正文:
第3节 基因工程的应用
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人教生物学 选择性必修3
[学习目标]
1.了解DNA片段的扩增及电泳鉴定的原理、步骤。
2.能够运用基因工程的原理,参与有关推广和应用基因工程产品等社会行为的讨论,理性地作出个人决策。
3.认同基因工程给现代农牧业、食品及医药等行业带来了深刻的变化,产生了巨大的社会效益和经济效益。
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必备知识 自主学习
核心要点 合作探究
课堂检测 素养达标
课时作业 巩固训练
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一 DNA片段的扩增及电泳鉴定
1.实验原理
(1)PCR原理:利用PCR可以在体外进行DNA片段的扩增。PCR利用了________________原理,通过调节温度来控制DNA双链的____________。
DNA的热变性
解聚与结合
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(2)电泳:DNA分子具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下,这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动。
(3)鉴定:PCR的产物一般通过________________来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与_____________________________________等有关。凝胶中的DNA分子通过染色,可以在波长为300 nm的紫外灯下被检测出来。
琼脂糖凝胶电泳
凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象
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2.方法步骤
(1)配制PCR反应体系,用微量移液器按照PCR反应体系的配方或PCR试剂盒的说明书,在微量离心管中依次加入各组分。待所有的组分都加入后,盖严离心管的盖子。将微量离心管放入________里,________约10 s,使反应液集中在管的底部。
离心机
离心
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(2)进行PCR参照下表的参数,设置好PCR仪的循环程序。将装有反应液的微量离心管放入________中进行反应。
循环程序 变性 复性 延伸
预变性 94 ℃,5 min — —
30次 94 ℃,30 s 55 ℃,30 s 72 ℃,1 min
最后1次 94 ℃,1 min 55 ℃,30 s 72 ℃,1 min
PCR仪
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(3)配制琼脂糖溶液:根据待分离DNA片段的大小,用____________配制琼脂糖溶液,一般配制质量体积比为____________的琼脂糖溶液。在沸水浴或微波炉内加热至琼脂糖熔化。稍冷却后,加入适量的________染料混匀。
(4)制备凝胶:将温热的琼脂糖溶液迅速倒入模具,并插入合适大小的梳子,以形成加样孔。待凝胶溶液完全凝固,小心拔出梳子,取出凝胶放入电泳槽内。
电泳缓冲液
0.8%~1.2%
核酸
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(5)加样:将电泳缓冲液加入电泳槽中,电泳缓冲液没过凝胶________为宜。将扩增得到的PCR产物与凝胶载样缓冲液(内含指示剂)混合,再用______________将混合液缓慢注入凝胶的加样孔内。留一个加样孔加入指示分子大小的标准参照物。
(6)电泳:接通电源,根据电泳槽阳极至阴极之间的距离来设定电压,一般为____________。待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时,停止电泳。
(7)取出凝胶置于紫外灯下观察和照相。
1 mm
微量移液器
1~5 V/cm
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二 基因工程在农牧业方面的应用
目前,基因工程技术已被广泛用于改良____________,提高作物和畜产品的产量等方面。
1.转基因________植物。
2.转基因________植物。
3.转基因__________植物。
4.改良植物的品质。
5.提高动物的__________。
6.改善畜产品的品质。
动植物品种
抗虫
抗病
抗除草剂
生长速率
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三 基因工程在医药卫生领域的应用
1.对微生物或动植物的细胞进行__________,使它们能够生产药物,是目前基因工程取得实际应用成果非常多的领域。
2.利用基因工程技术,还可以让哺乳动物批量生产药物。
(1)乳腺生物反应器
科学家将药用蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的________等调控元件重组在一起,通过__________的方法导入哺乳动物的________中,由这个受精卵发育成的转基因动物在进入泌乳期后,可以通过分泌乳汁来生产所需要的药物,这称为乳腺生物反应器或乳房生物反应器。
基因改造
启动子
显微注射
受精卵
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