内容正文:
第17讲 DNA是主要的遗传物质
一 肺炎链球菌转化实验
1.体内转化实验——格里菲思的实验
(1)实验材料:S型和R型肺炎链球菌、小鼠。
S型细菌
R型细菌
菌落
光滑
粗糙
菌体
有多糖类荚膜
无多糖类荚膜
致病
性
有,使人和小鼠患肺炎,小鼠并发败血症死亡
无
注:有荚膜的肺炎链球菌可抵抗吞噬细胞的吞噬,有利于细菌在宿主体内生活并繁殖。
(2)实验过程及结果
(3)结论:加热致死的S型细菌,含有某种促使R型活细菌转化为S型活细菌的活性物质——转化因子。
2.体外转化实验——艾弗里的实验
(1)实验方法、过程及结果
(2)分析细胞提取物的理化特性,发现这些特性与DNA的极为相似。
(3)结论
DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。
1.转化的实质是基因重组而非基因突变;肺炎链球菌转化实验是指S型细菌的DNA片段整合到R型细菌的DNA中,使受体细胞获得了新的遗传信息,即发生了基因重组(属于广义上的)。
2.加热并没有使DNA完全失去活性:加热杀死S型细菌的过程中,其蛋白质变性失活,但是其内部的DNA在加热结束后随着温度的降低又逐渐恢复活性。
3.自变量控制中的原理
(1)加法原理
与常态比较,人为增加某种影响因素。如在“比较H2O2在不同条件下的分解”的实验中,与对照组相比,实验组分别作加温、滴加FeCl3溶液、滴加肝脏研磨液的处理,就利用了加法原理。
(2)减法原理
与常态相比,人为去除某种影响因素。如在艾弗里的肺炎链球菌转化实验中,每个实验组特异性地去除了一种物质,从而鉴定出DNA是遗传物质。
二 噬菌体侵染细菌实验
1.实验方法
放射性同位素标记技术,用35S、32P分别标记噬菌体的蛋白质和DNA。
2.实验材料:T2噬菌体和大肠杆菌
(1)噬菌体的结构
(2)噬菌体的生活方式:活细胞寄生。
(3)噬菌体的增殖
增殖需要的条件
内容
合成噬菌体DNA
模板
噬菌体的DNA
原料
大肠杆菌提供的四种脱氧核苷酸
合成噬菌
体蛋白质
原料
大肠杆菌的氨基酸
场所
大肠杆菌的核糖体
3.实验过程及结果
(1)标记噬菌体
(2)噬菌体侵染细菌
①搅拌的目的:使吸附在细菌上的噬菌体与细菌分离。
②离心的目的:让上清液中析出质量较轻的T2噬菌体颗粒,沉淀物中留下被侵染的大肠杆菌。
③上清液和沉淀物中放射性结果分析
分组
结果
结果分析
对比
实验
(相互
对照)
被32P标
记的噬菌
体+细菌
32P主要分布在宿主细胞内,上清液中几乎无32P
32P-DNA进入了宿主细胞内
被35S标
记的噬菌
体+细菌
沉淀物内几乎无35S,35S主要分布在上清液中
35S-蛋白质外壳未进入宿主细胞,留在了外面
(3)检测子代噬菌体放射性
细菌裂解,释放出子代噬菌体,并检测子代噬菌体放射性。可以检测到32P标记的DNA,但却不能检测到35S标记的蛋白质。
4.结论
(1)噬菌体侵染细菌时,DNA进入细菌的细胞中,而蛋白质外壳留在细胞外。
(2)子代噬菌体的各种性状是通过亲代DNA遗传的——DNA才是噬菌体的遗传物质。
5.噬菌体侵染细菌实验中上清液和沉淀物放射性分析
(1)32P标记的噬菌体侵染未被标记的大肠杆菌
(2)35S标记的噬菌体侵染未被标记的大肠杆菌
1.噬菌体增殖场所是大肠杆菌细胞内,除噬菌体的DNA作模板起指导作用外,其余的原料——脱氧核苷酸和氨基酸、合成蛋白质的场所核糖体、ATP和相关酶全由大肠杆菌提供。
2.该实验不能标记C、H、O、N这些DNA和蛋白质共有的元素,否则无法将DNA和蛋白质区分开。
3.35S(标记蛋白质)和32P(标记DNA)不能同时标记在同一噬菌体上,因为放射性检测时只能检测到放射性存在的部位,不能确定是何种元素的放射性。
4.以细菌或病毒作为遗传物质探究的实验材料的优点
(1)细菌是单细胞生物,个体很小,结构简单,容易看出因遗传物质改变导致的结构和功能的变化。
(2)病毒无细胞结构,只有核酸和蛋白质外壳,T2噬菌体在侵染过程中,核酸和蛋白质会分开。
(3)都繁殖快,细菌20~30 min就可繁殖一代,病毒短时间内可大量繁殖。
三 烟草花叶病毒侵染实验
1.过程及结果
(1)烟草花叶病毒烟草叶出现病斑
2.结论:RNA是烟草花叶病毒的遗传物质。
四 DNA是主要的遗传物质
生物类型
所含核酸
遗传物质
举例
细胞
生物
真核
生物
DNA和
RNA
DNA
动物、植物、真菌
原核
生物
DNA
细菌
非细胞生物
DNA病毒
仅有DNA
DNA
T2噬菌体、乙肝病毒
RNA病毒
仅有RNA
RNA
烟草花叶病毒、HIV
结论:绝大多数生物的遗传物质是DNA,所以说DN