3.2 基因工程的基本操作程序（第二课时）-【学生物真有范】2022-2023学年高二生物同步精品备课资源（人教版2019选择性必修3）

第3章 第2节 人教版 选择性必修3 1 第二步：基因表达载体的构建 二/ 第一步：目的基因的筛选与获取 一/ 目录 CONTENTS 第三步：将目的基因导入受体细胞 三/ 第四步：目的基因的检测与鉴定 四/ DNA 片段的扩增及电泳鉴定 五/ 第二步：基因表达载体的构建 二/ 第一步：目的基因的筛选与获取 一/ 目录 CONTENTS 第三步：将目的基因导入受体细胞 三/ 第四步：目的基因的检测与鉴定 四/ DNA 片段的扩增及电泳鉴定 五/ 02 第二步：基因表达载体的构建 二 第二步：基因表达载体的构建 cDNA文库 5‘ 3‘ 3‘ 5‘ Bt基因 （目的基因） PCR（设计引物加上酶切位点） Bt基因 EcoRⅠ酶切位点 EcoRⅠ酶切位点 二 第二步：基因表达载体的构建 cDNA文库 5‘ 3‘ 3‘ 5‘ Bt基因 （目的基因） PCR（设计引物） Bt基因 EcoRⅠ酶切位点 EcoRⅠ酶切位点 质粒 EcoRⅠ酶切位点 二 第二步：基因表达载体的构建 cDNA文库 5‘ 3‘ 3‘ 5‘ Bt基因 （目的基因） PCR（设计引物） Bt基因！ EcoRⅠ酶切位点 EcoRⅠ酶切位点 质粒 EcoRⅠ酶切位点 （目的基因） Bt基因 二 第二步：基因表达载体的构建 Bt基因！ EcoRⅠ酶切位点 EcoRⅠ酶切位点 质粒 EcoRⅠ酶切位点 （目的基因） Bt基因 二 第二步：基因表达载体的构建 Bt基因！ EcoRⅠ酶切位点 EcoRⅠ酶切位点 质粒 EcoRⅠ酶切位点 Bt基因 （目的基因） 重组DNA分子 刚才模拟的是什么过程？ 二 第二步：基因表达载体的构建 基因表达载体构建的过程： 质粒 载体 限制酶 目的基因 限制酶切割位点 限制酶切割位点 限制酶 在构建抗虫棉的基因表达载体时，首先会用一定的限制酶切割载体，使它出现一个切口 用同种限制酶或 能产生相同末端的限制酶切割含有目的基因的DNA片段 DNA连接酶 重组 DNA分子 基因表达载体 （核心工作） 二 第二步：基因表达载体的构建 基因表达载体构建的过程： 质粒 载体 限制酶 目的基因 限制酶切割位点 限制酶切割位点 限制酶 在构建抗虫棉的基因表达载体时，首先会用一定的限制酶切割载体，使它出现一个切口 用同种限制酶或 能产生相同末端的限制酶切割含有目的基因的DNA片段 DNA连接酶 重组 DNA分子 基因表达载体 目的基因 （核心工作） 为什么要构建基因表达载体？ 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。 基因表达载体应该具备什么结构才能到达以上目的？ 二 第二步：基因表达载体的构建 Bt基因！ EcoRⅠ酶切位点 EcoRⅠ酶切位点 质粒 EcoRⅠ酶切位点 Bt基因 （目的基因） 基因表达载体 如果目的基因需要复制需要什么结构？ 复制原点 如果目的基因需要表达需要什么条件？ 需要启动子和终止子 启动子和终止子应该加在哪？ 启动子 终止子 位于基因首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA。 二 第二步：基因表达载体的构建 Bt基因 （目的基因） 基因表达载体 如果目的基因需要复制需要什么结构？ 复制原点 如果目的基因需要表达需要什么条件？ 需要启动子和终止子 启动子和终止子应该加在哪？ 启动子 终止子 位于基因首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA。 启动子类型： 诱导型启动子 组成型启动子 组织特异性启动子 二 第二步：基因表达载体的构建 Bt基因 （目的基因） 基因表达载体 如果目的基因需要复制需要什么结构？ 复制原点 如果目的基因需要表达需要什么条件？ 需要启动子和终止子 启动子和终止子应该加在哪？ 启动子 终止子 位于基因首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA。 启动子类型： 诱导型启动子 组成型启动子 组织特异性启动子 即在某些特定的物理或化学信号刺激后，基因转录水平在该类启动子的调控下大幅度地提升或降低。 诱导物 作用 诱导型启动子 激活或抑制 目的基因表达 如：光诱导表达基因启动子、热诱导表达基因启动子、创伤诱导表达基因启动子、真菌诱导表达基因启动子和共生细菌诱导表达基因启动子等。 二 第二步：基因表达载体的构建 Bt基因 （目的基因） 基因表达载体 如果目的基因需要复制需要什么结构？ 复制原点 如果目的基因需要表达需要什么条件？ 需要启动子和终止子 启动子和终止子应该加在哪？ 启动子 终止子 位于基因首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA。 启动子