内容正文:
生物技术与工程
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知识点1
传统发酵技术的应用与发酵工程及其应用
传统发酵技术
菌种来源:天然菌种,或上次的面团、卤汁
形式:固体发酵及半固体发酵为主,通常是家庭式或作坊式的。
特点:一般菌种是多样的,获得的产物一般不是单一的组分
2
知识点1
传统发酵技术的应用与发酵工程及其应用
发酵工程:
菌种来源:选育的具有特定功能的纯菌种
发酵形式:液体发酵
特点:发酵条件人为控制,需经过菌种选育,培养基的配置,灭菌,扩大培养等等。
知识点2
微生物的培养技术及其应用
一、微生物的培养基
1.概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
2.营养成分
(1)确定原则:根据微生物的需要。
(2)主要营养物质:碳源、氮源、水和无机盐。
(3)其他条件:pH、特殊营养(生长因子)和氧气
3.培养基种类:
(1)液体培养基、固体培养基、半固体培养基
(2)选择培养基、鉴别培养基
(3)天然培养基、合成培养基
4.培养基的制备
(1)步骤:计算→称量→溶化(→调pH)→定容→灭菌→倒平板。
5.分离某种微生物:
例:分离尿素(淀粉)分解菌-----选择培养基(以尿素(淀粉)为唯一氮源(碳源)的选择培养基)
鉴定:酚红指示剂----红色(碘液-----透明圈)
在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物生长,促进所需要的微生物的生长
根据微生物的特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的
细菌为6.5-7.5,放线菌为7.5-8.5,真菌为5.0~6.0。
知识点2
微生物的培养技术及其应用
二、消毒和灭菌
项目 条件 结果 常用方法 应用范围
消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部的部分微生物 煮沸消毒法 日常用品
巴氏消毒法 不耐高温的液体(如牛奶)
化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源
灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的徵生物,包括芽孢和孢子 灼烧灭菌法 接种工具
干热灭菌法 玻璃器皿、金属用具
高压蒸汽灭菌法 培养基及容器
在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物生长,促进所需要的微生物的生长
根据微生物的特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的
细菌为6.5-7.5,放线菌为7.5-8.5,真菌为5.0~6.0。
知识点2
微生物的培养技术及其应用
三、纯化的两种方法(稀释涂布平板法和平板划线法)
项目 平板划线法 稀释涂布平板法
纯化原理 通过连续划线操作实现 将菌液进行一系列的梯度稀释和涂布平板操作实现
注意事项 每次划线前后均需灼烧接种环 稀释度要足够高
菌体获取 在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体 从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌体
优点 可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落 既可以获得单细胞菌落,又能对微生物计数
缺点 不能对微生物计数 操作复杂,需要涂布多个平板
在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物生长,促进所需要的微生物的生长
根据微生物的特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的
细菌为6.5-7.5,放线菌为7.5-8.5,真菌为5.0~6.0。
直接计数法(显微镜直接计数法) 间接计数法(活菌计数法)
原理 常利用细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定体积的样品中微生物的数量 当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的单个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中大约含有多少活菌
主要用具 显微镜、细菌计数板或血细胞计数板 培养基
计数依据 菌体本身 培养基上的菌落数
优点 计数方便、操作简单 计数的是活菌
缺点 死菌、活菌都计算在内 操作较复杂有一定误差
计算公式 以25×16型血细胞计数板为例,每毫升原液含菌数=400×10000×每小格平均菌体数×稀释倍数 每毫升原液含菌数=培养基上平均菌落数目÷涂布平板时所用稀释液的体积(mL)×稀释倍数
知识点2
微生物的培养技术及其应用
四、计数的两种方法
知识点2
微生物的培养技术及其应用
五、两个对照组
判断培养基是否被污染------未接种的同种培养基
判断是否具有选择作用------接种等量菌液的牛肉膏蛋白胨培养基
知识点3
植物细胞工程
一、植物组织培养(原理:植物细胞的全能性)
根、芽
植物体
脱分化
再分化
培养条件:
①无菌
②营养物质
③适宜环境(温度、PH、光等)
④植物激素:
细胞分裂素 生长素
遮光
一定的光照
排列不规则,高度液泡化,呈不定型状态的薄壁细胞
愈伤组织
离体的植物器官、组织或细胞(外植体)
愈伤组织重新分化为芽、根等器官
失去特有结构和功能转变成未分化的细胞
知识点3
植物细胞工程
二、植物体