内容正文:
第3章 基因工程
3.4 蛋白质工程的原理和应用
1
学习目标
蛋白质工程的基本原理
蛋白质工程的实际应用
蛋白质工程崛起的缘由
课本P93
基因工程的实质及局限性
基因工程是将一种生物的基因转移到另一种生物体内,使后者可以产生它原本不能产生的蛋白质,进而表现出新性状。
①基因工程原则上只能生产自然界中已经存在的蛋白质
2. 基因工程的局限性
②天然蛋白质的缺陷:天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的,它们的结构和功能符合特定物种生存的需要,却不一定完全符合人类生产和生活的需要
1. 基因工程的实质
蛋白质工程
课本P93
以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过改造或合成基因,来改造现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求
改造或合成基因
改造现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质
在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程
分子生物学、晶体学和计算机技术
基础
操作方法及对象
结果
目的
操作对象:
结果:
与基因工程的关系:
理论和技术:
练习
课本P92
下列关于蛋白质工程的叙述,错误的是( )
A.分析蛋白质分子的结构是蛋白质工程的研究内容之一
B.蛋白质工程只能生产自然界中已经存在的蛋白质
C.蛋白质工程崛起的原因是天然蛋白质不能够完全满足人类生产、生活的需要
D.蛋白质工程可以制造一种新的蛋白质,也可以对现有的蛋白质进行改造
蛋白质工程
课本P93-94
实例:对天然酶的改造
赖氨酸合成
调控
达到一定浓度
两种酶的活性
352位的苏氨酸变成异亮氨酸
二氢吡啶二羧酸合成酶
天冬氨酸激酶
+
104位的天冬酰胺变成异亮氨酸
赖氨酸含量
抑制
提高
提高
限制
提高
提高5倍
提高2倍
问题:白质工程是怎样进行的呢?
蛋白质工程的基本原理
课本P94
1. 目标:根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行设计改造,由于基因决定蛋白质,因此,对蛋白质的结构进行设计改造,最终通过改造或合成基因来完成
2. 天然蛋白质合成过程:按照中心法则
思考:为什么蛋白质工程改造基因而不是直接改造蛋白质?
①蛋白质的高级结构十分复杂,直接改造难度大
②蛋白质是由基因编码的,改造了基因可以间接改造蛋白质
③基因可以遗传,蛋白质无法遗传
蛋白质工程的基本原理
课本P94
从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→获得所需要的蛋白质
生物功能
转录
翻译
折叠
行使
mRNA
预期功能
设计
蛋白质
(三维结构)
推测
改造或合成
目的基因
多肽链
思考:与中心法则的关系?
蛋白质工程是中心法则的逆推
蛋白质工程的基本原理
课本P94
某多肽链的一段氨基酸序列是:
丙氨酸
苯丙氨酸
色氨酸
谷氨酸
赖氨酸
问题: 怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?请把相应的碱基序列写出来。
查密码子表得知:
推知mRNA序列为:
丙氨酸(GCU、GCC、GCA、GCG)、色氨酸(UGG)、赖氨酸(AAA、AAG)、谷氨酸(GAA、GAG)、苯丙氨酸(UUU、UUC)
GCU(或C或A或G)UGG AAA(或G)GAA(或G)UUU(或C)
思考·讨论 蛋白质工程基本思路的应用
蛋白质工程的基本原理
课本P94
某多肽链的一段氨基酸序列是:
丙氨酸
苯丙氨酸
色氨酸
谷氨酸
赖氨酸
推知mRNA序列为:
GCU(或C或A或G) UGG AAA(或G) GAA(或G) UUU(或C)
思考·讨论 蛋白质工程基本思路的应用
脱氧核苷酸序列
GCT(或C或A或G) TGG AAA(或G) GAA(或G) TTT(或C)
CGA(或G或T或C) ACC TTT(或C) CTT(或C) AAA(或G)
问题: 确定目的基因的碱基序列后,怎样才能合成或改造目的基因?
可以人工合成目的基因或从基因文库中获取目的基因
对基因的改造经常会用到基因定点突变技术来进行碱基的替换、增添等
项目 蛋白质工程 基因工程
区别
起点
过程
实质
结果
应用及现状
联系
预期蛋白质功能
目的基因
预期蛋白质功能→设计蛋白质结构
→推测氨基酸序列→推测脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质
目的基因的筛选与获取→基因表达载体的构建→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定
通过改造相应的基因达到对蛋白质进行改造的目的
基因重组
可以创造出自然界不存在的蛋白质
生产自然界已存在的蛋白质
①主要集中在对现有蛋白质进行改造
②对创造新的蛋白质还有许多技术难题未突破,因为蛋白质高级结构非常复杂,人们对此知之甚少
已被广泛应用,如转基因植物、动物、药品生产等已商业化
①蛋白质工程获得目的基因后,需