3.1 重组DNA技术的基本工具（第二课时）-【学生物真有范】2022-2023学年高二生物同步精品备课资源（人教版2019选择性必修3）

第3章 第1节 人教版 选择性必修3 1 重组 DNA 技术的基本工具 一/ 目录 CONTENTS 限制性内切核酸酶 — “分子手术刀” 1/ DNA连接酶 — “分子缝合针” 2/ 基因进入受体细胞的载体 — “分子运输车” 3/ 重组 DNA 技术的基本工具 一/ 目录 CONTENTS 限制性内切核酸酶 — “分子手术刀” 1/ DNA连接酶 — “分子缝合针” 2/ 基因进入受体细胞的载体 — “分子运输车” 3/ 02 DNA连接酶 — “分子缝合针” 二 DNA连接酶 — “分子缝合针” 苏-基因2 Bt基因 5’ 3’ 3’ 5’ 苏云金杆菌DNA片段中的部分基因 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 3’ 目的基因切割下来后怎么把它重新连起来呢？ 二 DNA连接酶 — “分子缝合针” 苏-基因2 Bt基因 5’ 3’ 3’ 5’ 目的基因切割下来后怎么把它重新连起来呢？ 某DNA片段 5’ 3’ 3’ 5’ 某DNA片段 …… TCCCTAAGGAATTCCATCCCAGATG……CATGCA……CCACATG …… …… AGGGATTCCTTAAGGTAGGGTCTAC……GTACGT……GGTGTAC …… 5’ 3’ 3’ 5’ 你知道如何将Bt基因插入下面DNA片段中吗？ 用EcoRⅠ限制酶切割该DNA片段 二 DNA连接酶 — “分子缝合针” 苏-基因2 Bt基因 5’ 3’ 3’ 5’ 某DNA片段 5’ 3’ 3’ 5’ 你知道如何将Bt基因插入下面DNA片段中吗？ 用EcoRⅠ限制酶切割该DNA片段 如何将他们连接起来呢？ 它们具有相同的黏性末端! 5’ 3’ 3’ 5’ 二 DNA连接酶 — “分子缝合针” 苏-基因2 Bt基因 5’ 3’ 3’ 5’ 用EcoRⅠ限制酶切割该DNA片段 如何将他们连接起来呢？ DNA连接酶 — “分子缝合针” 它们具有相同的黏性末端! 恢复被限制酶切开的磷酸二酯键 完全互补的黏性末端能通过氢键暂时连接在一起，但并不稳定。 而要形成重组DNA分子，还必须使基本骨架之间通过磷酸二酯键 “ 缝 ” 上，就像断成两截的梯子，不仅要把中间的踏板连接起来，还要把两边的扶手连接在一起一样 。 二 DNA连接酶 — “分子缝合针” 苏-基因2 Bt基因 5’ 3’ 3’ 5’ 用EcoRⅠ限制酶切割该DNA片段 如何将他们连接起来呢？ DNA连接酶 — “分子缝合针” 它们具有相同的黏性末端! 恢复被限制酶切开的磷酸二酯键 完全互补的黏性末端能通过氢键暂时连接在一起，但并不稳定。 而要形成重组DNA分子，还必须使基本骨架之间通过磷酸二酯键 “ 缝 ” 上，就像断成两截的梯子，不仅要把中间的踏板连接起来，还要把两边的扶手连接在一起一样 。 二 DNA连接酶 — “分子缝合针” 苏-基因2 Bt基因 5’ 3’ 3’ 5’ 用EcoRⅠ限制酶切割该DNA片段 如何将他们连接起来呢？ DNA连接酶 — “分子缝合针” 它们具有相同的黏性末端! 恢复被限制酶切开的磷酸二酯键 磷酸二酯键形成 完全互补的黏性末端能通过氢键暂时连接在一起，但并不稳定。 而要形成重组DNA分子，还必须使基本骨架之间通过磷酸二酯键 “ 缝 ” 上，就像断成两截的梯子，不仅要把中间的踏板连接起来，还要把两边的扶手连接在一起一样 。 10 二 DNA连接酶 — “分子缝合针” 苏-基因2 Bt基因 5’ 3’ 3’ 5’ 用EcoRⅠ限制酶切割该DNA片段 如何将他们连接起来呢？ DNA连接酶 — “分子缝合针” 它们具有相同的黏性末端! 恢复被限制酶切开的磷酸二酯键 磷酸二酯键形成 完全互补的黏性末端能通过氢键暂时连接在一起，但并不稳定。 而要形成重组DNA分子，还必须使基本骨架之间通过磷酸二酯键 “ 缝 ” 上，就像断成两截的梯子，不仅要把中间的踏板连接起来，还要把两边的扶手连接在一起一样 。 DNA连接酶: 一种能够将两个DNA片段连接起来的酶 片段1 片段2 片段3 11 二 DNA连接酶 — “分子缝合针” 5’ 3’ 3’ 5’ DNA连接酶: 一种能够将两个DNA片段连接起来的酶 片段1 片段2 片段3 将片段1与片段2连接 将片段2与片段3连接 DNA连接酶 DNA连接酶种类 E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 12 二 DNA连接酶 — “分子缝合针” 5’ 3’ 3’ 5’ DNA连接酶: 一种能够将两个DNA片段连接起来的酶 片段1 片段2 片段3 将片段1与片段2连接 将片段2与片段3连接 DNA连接酶 DNA连接酶种类 E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 从大肠杆菌（Escherichia coli） 中分离得到的 从T4噬菌体中分