高考生物必背核心知识NO.7——选必3 第3章 基因工程

高考生物核心必备知识背诵 NO.7 选必3 第3章 基因工程 核心必备知识 课本P67—69，问题 1.艾弗里等人通过肺炎链球菌的转化实验，不仅证明了遗传物质是DNA，还证明了什么？ 1.DNA可以在同种生物的不同个体之间转移。 2.科学家证明质粒可以作为基因工程的载体，构建重组DNA，导入受体细胞，使外源基因在原核细胞中成功表达，并实现了什么，至此基因工程问世？ 2.物种间的基因交流。 3.基因工程的工具和工具酶分别是什么？ 3.工具：限制酶、DNA连接酶、载体 工具酶：限制酶、DNA连接酶 4.由基因工程的概念分析：操作环境？操作水平？目的？原理？优势？其他名称？ 4.操作环境：体外 操作水平：DNA分子水平 目的：产生符合人们需要的新的生物类型和生物产品 原理：基因重组 基因工程最大的优势：定向改造生物的遗传性状 其他名称：重组DNA技术、 转基因技术 5.基因拼接的原理？外源基在受体细胞中表达的原理？ 5.目的基因和载体都是由脱氧核苷酸组成的，都是双螺旋结构 生物界共用一套遗传密码。 6.启动子、起始密码子、终止子、终止密码子的比较 启动子≠起始密码；终止子≠终止密码，密码子是mRNA上的，参与翻译过程 第1节 重组DNA技术的基本工具 1.限制酶的全称？主要来源？在原核生物中的作用？ 1.限制性内切核酸酶 来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的 2.限制酶的作用特点？作用结果？ 作用的化学键？ 2.作用特点：识别特定的核苷酸序列，切割特定部位的磷酸二酯键 结果：产生黏性末端或平末端 磷酸二酯键 3.限制酶不破坏自身DNA的原因是什么？ 3.①细胞自身的DNA分子没有该限制酶的识别序列 ②甲基化酶对识别序列进行了修饰 4. DNA连接酶的作用？分类及连接的末端？ 4.恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 ①E.coliDNA连接酶：来源于大肠杆菌； 只能连接黏性末端 ②T4DNA连接酶：来源于T4噬菌体； 能连接黏性末端、平末端（效率较低） 5.DNA聚合酶和DNA连接酶有什么区别？ 5.①DNA聚合酶催化单个核苷酸连接到已有的核酸片段3’端，形成磷酸二酯键；DNA连接酶催化两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 ②DNA聚合酶催化形成与模板链互补的DNA链；DNA连接酶催化DNA片段连接起来，不需要模板 6.载体的种类？质粒的结构？ 6.质粒、噬菌体、动植物病毒 一种裸露的、结构简单的、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 7.作为载体必须具备的条件？ 7.①能在受体细胞中复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，便于重组DNA分子的筛选 ④对受体细胞无害。 8.（1）DNA粗提取与鉴定的原理？ （2）不能选择哺乳动物成熟的红细胞的原因？ （3）研磨后过滤的方案是？ （4）①4℃冰箱放置几分钟的作用？②搅拌时应轻缓、并沿一个方向的原因？ （5）鉴定试剂 （6）提取和分离DNA用塑料离心管的原因是？ 8.（1）①DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精 ②DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，溶于2mol/L的NaCl溶液③鉴定原理：DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色 （2）哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和线粒体，几乎不含DNA （3）①4℃冰箱静置后取上清液 ②直接将研磨液倒入塑料离心管中，离心后取上清液 （4）①抑制核酸水解酶的活性，进而抑制DNA降解 ②减少DNA断裂，以便获得较完整的DNA分子 （5）二苯胺 （6）细胞破碎后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附；由于细胞内DNA的含量本来就比较少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就会更少。 第2节 基因工程的基本操作程序 1.基因工程的4步？ 1.目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和鉴定_ 2.目的基因是指？Bt基因来自于哪种菌？ Bt抗虫蛋白如何造成害虫死亡？Bt抗虫蛋白为何不会引起人畜死亡？ 2.用于改变受体细胞性状和获得预期表达产物的基因 ，主要是编码蛋白质的基因，也可以是调控因子 苏云金杆菌 当Bt抗虫蛋白被分解为多肽后，多肽与害虫肠上皮细胞特异性受体结合，导致细胞膜穿孔，最后造成害虫死亡 Bt抗虫蛋白只有在某类昆虫肠道的碱性环境中才能表现出毒性，而人和牲畜的胃液呈酸性，肠道细胞也没有特异性受体，所以不会引起人畜死