模块五生物技术与工程03 基因工程-【划重点】2023年高考生物二轮复习重点专攻课件

考情 1.考查题型：基因工程多以简答题呈现 2.命题趋势：基因工程几乎每年均有考查，多以基因工程的基本程序为背景，既可单独考查其中相关的生物学原理和注意事项，也可结合细胞工程、发酵工程进行综合考查。 ①PCR为目的基因提供酶切位点等内容相对困难，需要做全方位梳理 ②基因工程难度大，需要多练限制酶选择，正反接检测和基因编辑等情景 模块五 生物技术与工程 03 基因工程 概念5 基因工程赋予生物新的遗传特性 5.1基因工程是一种重组DNA 技术 5.2蛋白质工程是基因工程的延伸 1 一、基因工程的3种基本工具 （1）根据目的基因确定限制酶 ①应选择位于目的基因两端的限制酶； ②不能选择目的基因内部的限制酶；（2）根据质粒的特点确定限制酶 ①通常选择与切割目的基因相同的限制酶，确保出现相同的黏性末端； ②在只有一种标记基因时，选择的限制酶不能破坏标记基因。 二、熟记基因工程的四个操作步骤 例1.基因工程载体是DNA重组技术使用的基本工具。回答下列问题： 1)大肠杆菌的质粒常被用来做基因工程中的载体，其主要优点是_______ ______________________________________________(至少两项)。基因工程中常使用的载体除质粒外，还有_________________________(至少两项)。 2)在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上进行人工改造过的。在构建基因表达载体时，通过人工改造，基因表达载体中除了含有目的基因外，还必须有________________________等。构建目的基因表达载体的目的一方面是使目的基因在受体细胞中________，并遗传给下一代；另一方面，使目的基因能够________________，从而得到转基因产品或生物。 能自主复制，有标记基因，有一个至多个酶切位点 噬菌体、动植物病毒 启动子、终止子和标记基因 稳定存在 表达并发挥作用 例2.（2022湖北节选） 提取品系乙的mRNA，通过基因重组技术，以Ti质粒为表达载体，以品系甲的叶片外植体为受体，培有出转S基因的新品系。 3）如图是S基因的cDNA和载体的限制性内切核酸酶（限制性核酸内切酶）酶谱。为了成功构建重组表达载体，确保目的基因插入载体中方向正确，最好选用_________________酶切割S基因的cDNA和载体。 XbaⅠ、HindⅡ 例3.（2021 辽宁）（2）图1为所用载体图谱示意图，图中限制酶的识别序列及切割位点见下表。为使phb2基因（该基因序列不含图1中限制酶的识别序列）与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入________和________两种不同限制酶的识别序列。经过这两种酶酶切的phb2基因和载体进行连接时，可选用________________（填“E.coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）。 相关限制酶的识别序列及切割位点 名称 识别序列及切割位点 名称 识别序列及切割位点 HindⅢ A↓AGCTT TTCGA↑A EcoRI G↓AATTC CTTAA↑G PvitⅡ CAG↓CTG GTC↑GAC PstI CTGC↓AG GA↑CGTC KpnI G↓GTACC CCATG↑G BamHI G↓GATCC CCTAG↑G 注：箭头表示切割位点 EcoRI PvitⅡ T4DNA连接酶 例4.科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。该过程所用的质粒A与含生长激素基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示，其中切割位点相同的酶不重复标注。限制性内切核酸酶<m></m>Ⅰ、</m>Ⅰ、</m>Ⅰ、<m></m> Ⅲ，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为<m></m>、 <m></m>、<m></m>，下列相关叙述错误的是( )。 A.图1质粒中未标注出的结构是复制原点 B.图2中的DNA用</m> Ⅰ完全酶切后，反应管中有4种DNA片段 C.Ⅰ酶切的DNA末端与 <m>Ⅰ酶切的DNA末端连接，连接部位用Ⅰ一定能切开 D.在构建基因表达载体时，为防止目的基因的反向连接，应选用限制酶 <m></m> Ⅲ和<m>Ⅰ切割质粒，选用限制酶 <m></m> Ⅲ和 <m></m> Ⅰ切割含目的基因的DNA片段 C 返回目录 突破21 以“分析构建基因表达载体的方法”突破基因工程 7 例5.用A和B两种限制酶同时和分别处理同一DNA片段，限制酶对应切点一定能切开。两种酶的酶切位点及酶切产物电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述错误的是( )。 C A.图1中限制酶 <m>、</m>识别的核苷酸序列不相同 B.图1中代表的碱基对数为4500