内容正文:
第十三单元 基因工程
第1讲 基因工程的基本工具和操作过程
[基础对点练]
1.(2023·山西长治高三质检)下列关于基因工程的叙述,正确的有几项( )
①限制酶只能从原核生物中分离纯化得到
②E.coli DNA连接 酶只能连接平末端的DNA片段
③质粒是仅存在于原核细胞拟核DNA之外的环状双链DNA分子
④限制酶和DNA连接酶作用的部位都是氢键
A.0项 B.1项
C.2项 D.3项
解析:A [①限制酶主要从原核生物中分离纯化得到,①错误;②E.coli DNA连接酶只能连接黏性末端的DNA片段,②错误;③质粒是主要存在于原核细胞拟核DNA之外的环状双链DNA分子,③错误;④限制酶和DNA连接酶作用的部位都是磷酸二酯键,④错误。故选A。]
2.(2023·福建泉州高三质检)像BclⅠ(-T↓GATCA-)、BglⅡ(-A↓GATCT-)、MboⅠ(-↓GATC-)这样,识别序列不同,但能产生相同的黏性末端的一类限制酶被称为同尾酶。如图表示目的基因及质粒上的酶切位点。选用不同的限制酶对质粒和目的基因进行切割,并用DNA连接酶进行连接。下列分析错误的是( )
选项
切割质粒
切割目的基因
结果分析
A
BclⅠ和BglⅡ
BclⅠ和BglⅡ
形成的重组质粒的碱基排列顺序不一定相同
B
BclⅠ和BglⅡ
Mbo Ⅰ
切割后的质粒不可自我环化,切割后的目的基因可以自我环化
C
Mbo Ⅰ
BclⅠ和BglⅡ
形成的重组质粒可被MboI再次切开,但可能无法被Bcl Ⅰ和Bgl Ⅱ再次切开
D
Mbo Ⅰ
Mbo Ⅰ
切割后的质粒可以自我环化,切割后的目的基因也可以自我环化
解析:B [切割质粒和切割目的基因用均用BclⅠ和BglⅡ,由于两种酶切割后产生的黏性末端相同,形成的重组质粒时目的基因可能反向连接,形成的碱基排列顺序不一定相同,A正确;切割质粒用BclⅠ和BglⅡ,切割后产生的黏性末端相同,切割后的质粒可能自我环化;切割目的基因用MboⅠ,切割后产生黏性末端,切割后的目的基因可以自我环化,B错误;切割质粒用MboⅠ,产生黏性末端,切割目的基因用BclⅠ和BglⅡ,产生黏性末端,形成的重组质粒中原来的BclⅠ和BglⅡ的切割位点的序列发生改变,不能再被这两种酶切割,但不影响Mbo Ⅰ的作用,C正确;切割质粒用Mbo Ⅰ,切割目的基因用MboⅠ,产生的均为黏性末端,切割后的质粒可自我环化,切割后的目的基因也可以自我环化,D正确。]
3.(2023·广东高三大联考)如图1表示限制酶Spe Ⅰ、Xba Ⅰ的识别序列和切割位点,图2表示基因P(960 bp)、基因Q(840 bp)的限制酶Spe Ⅰ或Xba Ⅰ的酶切图谱和融合基因,图3表示几种基因经限制酶Spe Ⅰ或Xba Ⅰ处理后进行电泳(电泳条带表示特定长度的DNA片段)得到的带谱图,下列相关分析错误的是( )
A.基因P经限制酶Spe Ⅰ处理后进行电泳的结果与图3中的I相同
B.基因Q经限制酶Xba Ⅰ处理后进行电泳的结果与图3中的Ⅱ相同
C.融合基因经限制酶Spe Ⅱ处理后进行电泳的结果与图3中的Ⅲ相同
D.融合基因经限制酶Xba Ⅰ处理后进行电泳的结果与图3中的Ⅳ相同
解析:C [由题意可知基因P长度为960bp,图3结果Ⅰ的两个条带总长度为960bp,是基因P的酶切、电泳结果,A正确;基因Q长度为840bp,图3结果Ⅱ的两个条带总长度为840bp,是基因Q的酶切、电泳结果,B正确;黏性末端连接后的序列为—ACTAGA—,融合基因不能被限制酶Spe Ⅰ或Xba Ⅰ识别和切断,因此经限制酶Spe Ⅰ或经限制酶Xba Ⅰ处理,电泳的结果都与题图3中的Ⅳ相同,C错误,D正确。]
4.(2023·北京大兴区高三期中)基因S与作物甜度相关,可用于培育转S基因作物新品系。如图,为使S基因按正确方向与质粒连接,选用的限制酶组合是( )
A.XbaⅠ和SalⅠ B.EcoRⅠ和HindⅢ
C.BamHⅠ和HindⅢ D.XbaⅠ和HindⅢ
解析:D [质粒中SalⅠ的酶切位点没有位于启动子和终止子之间,不能选用,A错误;S基因两端都有EcoR Ⅰ的酶切位点,不能保证S基因与质粒连接的方向正确,B错误;BamHⅠ会破坏目的基因,C错误;为了成功构建重组表达载体,不破坏载体关键结构和目的基因,确保目的基因插入载体中方向正确,最好选用XbaⅠ、HindⅢ酶切割S基因和载体,D正确。]
5.(2023·北京101中学高三月考)用农杆菌侵染水稻(二倍体)细胞,获得1条染色体上R基因被插入T-DNA的个体T0。T-DNA插入基因的位置如图1所示。T0自交得T1,同时用P1、P2、P3为引物检测T1个体的基因组成情况,如图