备课素材：基因工程问题归纳2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

基因工程问题归纳 1.DNA重组技术的基本工具：限制性核酸内切酶（限制酶），DNA连接酶，运载体。 2.基因工程中用到的酶，及其作用： 限制酶：切割DNA。 DNA连接酶：把DNA片段拼接成新的DNA。 3.基因表达载体的组成：目的基因，启动子，终止子，标记基因。 4.启动子的作用：驱动目的基因转录出mRNA，最终获得所需蛋白质。 5.终止子的作用：终止mRNA的转录。 6.标记基因的作用：为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 7.基因工程的变异原理：基因重组。 8.DNA分子杂交技术的原理：碱基互补配对原则。 9.PCR技术的原理：DNA双链复制的原理（碱基互补配对）。 10.获取目的基因的方法：①从基因文库中获取。②利用PCR技术扩增。③利用化学方法人工合成。 11.将目的基因导入植物细胞的方法：①农杆菌转化法。②基因枪法。③花粉管通道法。 12.将目的基因导入动物细胞的方法：显微注射技术。 13.将目的基因导入微生物细胞的方法：用处理成感受态细胞。 14.检测目的基因是否插入受体细胞的方法：DNA分子杂交技术。 15.检测是否转录出mRNA的方法：分子杂交技术。 16.检测是否翻译出蛋白质的方法：抗原—抗体杂交。 17.基因工程常用的载体有哪些：质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒 18.培育转基因植物常用什么细胞做受体细胞：受精卵或体细胞。 19.培育转基因动物常用的细胞：受精卵 20.基因工程制药常用的受体细胞：微生物细胞 21.基因工程的载体必须具备的条件： ①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存； ②具有一至多个限制酶切点，以便与外源基因连接 ③具有某些标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 ④对受体细胞无害 ⑤载体DNA分子大小应合适，以便提取和在体外进行操作 22.基因工程操作的核心步骤：基因表达载体的构建 23.构建基因表达载体的目的： ①使目的基因在受体细胞中稳定遗传，并且可以遗传下一代。 ②使目的基因能够表达和发挥作用。 24.目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键：转基因生物的DNA上是否插入了目的基因。 25.Ti质粒上的T—DNA的特点： Ti质粒上的T—DNA（可转移的DNA）可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上。 26.农杆菌转化法中构建基因表达载体时目的基因插入的部位：Ti质粒上的T—DNA上 学科网（北京）股份有限公司 $