内容正文:
2.1 植物细胞工程
2.2 动物细胞工程
2.3 胚胎工程
第2章 细胞工程
希普:首例胚胎移植成功
哈里森:首创动物组织体外培养法
张明觉:发现哺乳动物精子获能现象
格登、童第周:体细胞核移植成功
试管家兔诞生
米尔斯坦和科勒:创立单克隆抗体技术
胚胎分割移植成功
埃文斯:成功分离和培养小鼠的胚胎干细胞
克隆羊多莉诞生
山中伸弥:获得诱导多能干细胞
单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生
我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。
1890年
1907年
1951年
1958年
1959年
1975年
1978年
1981年
1996年
2006年
2014年
2017年
动物细胞工程的发展历程
P33 科技探索之路
2
第2章 细胞工程
第2节 动物细胞工程
一、动物细胞培养
本节聚焦
动物细胞培养需要哪些基本条件?
动物细胞培养的基本操作过程是什么?
怎样客观分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险?
在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。
那么:怎样获得大量的自体健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤?
动物细胞培养
动物细胞核移植
动物细胞融合
动物细胞工程
是最基础的技术
思考:什么是动物细胞培养?
【P43 从社会中来】
通过细胞培养构建的人造皮肤
操作原因:
原理:
对象:
从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
细胞增殖
一般是指动物胚胎或出生不久的幼龄动物组织,因为这些组织细胞比老龄动物的组织细胞生命力旺盛,易于培养,同时增殖能力也更强。
将组织块分散成单个细胞后,细胞所需的营养容易供应,其代谢废物容易排出。
01
动物细胞培养的条件
1.动物细胞培养的概念:P43
那么,动物细胞的培养需要哪些条件呢?
将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基
含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质,满足细胞对未知营养成分的需求。
培养基的构成:合成培养基 + 血清等天然成分
一般使用液体培养基,也称为培养液
01
动物细胞培养的条件
2.培养条件: P43-44
充足的营养、稳定的内环境
①适宜的温度:哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜;
②适宜的pH:多数动物细胞生存的适宜pH为________ ;
③适宜的渗透压:维持细胞正常的形态和功能。
①培养液、培养用具:灭菌处理;
②无菌操作;③适量添加抗生素
定期更换培养液,以便清除代谢物。
01
动物细胞培养的条件
2.培养条件:P44
36.5±0.5℃
7.2-7.4
维持培养液的pH
95%空气 + 5%CO2 的CO2 培养箱
CO2培养箱
松盖培养瓶
01
动物细胞培养的条件
O2:细胞代谢所必需
2.培养条件:P44
2.下列关于动物细胞培养所需条件的叙述,错误的是( )
A.无毒、无菌的环境
B.温度与动物体温相近
C.合成培养基中通常需加入血清
D.不需要O2,需要CO2调节培养液的pH
A
1.动物细胞工程常用的技术中最基础的是 ( )
A.动物细胞培养 B.单克隆抗体
C.动物细胞融合 D.动物细胞核移植
D
思考:动物细胞培养的基本操作过程是什么?
任务一:请同学们自主阅读教材P44-45,小组合作思考讨论完成问题。
1.体外培养动物细胞有哪些类型?
2.请简述动物细胞培养的过程。
3.为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?
4.为什么将取出的组织分散成单个细胞?如何将组织分散成单个细胞?说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶可以吗?
5.什么是细胞贴壁?什么是接触抑制?
6.为什么要进行分瓶培养?怎么处理?
7.什么是原代培养和传代培养?两种“培养”都用到胰蛋白酶处理,对象相同吗?
第1类:悬浮生长细胞
第2类:贴壁生长细胞
(大多数)
接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖。
悬浮培养瓶
细胞贴壁:在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上。
02
动物细胞培养的过程
1.体外培养的动物细胞分类:P44
取动物组织
制成细胞悬液
转入培养液进行原代培养
放入CO2培养箱中培养
传代培养
放入CO2
培养箱中培养
用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法,将组织分散成单个细胞
02
动物细胞培养的过程
2.培养过程:P45
一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,原因:细胞分化程度低,增殖能力强,容易培养。
P45思考*