第三章 第2节　第2课时　实验：DNA片段的扩增及电泳鉴定-2022-2023学年新教材高中生物选择性必修3【南方凤凰台·5A新学案】人教版2019（课件）

第3章 基因工程 第2节　基因工程的基本操作程序 第2课时　实验：DNA片段的扩增及电泳鉴定 高考总复习 一轮复习导学案 · 数学（提高版） 5A新学案 生物·选择性选修3 1 学习目标 素养目标 1. DNA片段的扩增及电泳鉴定的原理(重点)； 2. DNA片段的扩增及电泳鉴定的方法步骤(难点) 科学探究：通过“探究·实践”活动“DNA片段的扩增及电泳鉴定”，使学生在学习相关操作并加深对PCR的认识中发展科学探究素养 南方凤凰台 · 5A新学案 生物·选择性选修3 2 核心概念 1．实验原理 (1)PCR利用了_____________________和DNA半保留复制的原理。 (2)电泳鉴定中，DNA分子的迁移速率与_______________、DNA分子的_______________等有关。然后通过染色后在紫外灯下检测。 DNA的热变性 凝胶的浓度 大小和构象 核心概念 2．实验过程 核心概念 [概 念 辨 析] (1)离加样孔远的DNA片段小，近的DNA片段则大。( 　　) (2)该实验过程中可直接使用蒸馏水。( 　　) (3) 待指示剂前沿迁移到达凝胶边缘时停止电泳。( 　　) (4) 缓冲液和酶应在－20 ℃储存，使用前迅速融化。( 　　) (5) PCR时根据目的片段长度适当调整延伸时间。( 　　) × × × × √ 核心概念 目标导学 7 1．教材P84“探究·实践”——实验原理 (1)DNA热变性的难易程度跟DNA分子中_________________________________ 有关，该比例越高，________________________越高，越___热变性。 目标一　实验原理和材料用具 具有3个氢键的G—C碱基对的比例 DNA的热稳定性 难 目标导学 (2)一般在PCR实验中引物的添加量______(选填“大于”“小于”或“等于”)实际所需量，原因：______________________________________________________ ________________________。 能任意增大添加量吗？______。 (3)影响DNA分子迁移速率的因素 ①_______________：凝胶浓度高，则迁移速率___。 ②_________________________________：DNA分子大，则迁移速率___。 大于 复性时不一定均为引物与DNA模板结合，也存在DNA解开的 两条单链的结合 不能 凝胶的浓度 低 DNA分子的大小和构象 低 目标导学 2. 教材P84“探究·实践”——材料用具 (1)该过程中有哪几种缓冲液？ ①_______________：TAE或TBE，为DNA分子带上电荷提供一定的pH。 ②_____________________：内含指示剂——溴酚蓝，指示剂前沿迁移到凝胶边缘时，停止电泳。 ③_______________：内含Mg2＋，为PCR提供一定的液体环境和pH等条件。 (2)说出发挥以下作用的工具。 ①自动控温，实现DNA的扩增：____________； ②实际进行PCR反应的场所：_______________； ③向微量离心管转移PCR配方中的液体：_______________。 电泳缓冲液 凝胶载样缓冲液 扩增缓冲液 PCR仪 微量离心管 微量移液器 目标导学 关于DNA片段的扩增及电泳鉴定的实验，错误的是( 　　) A．PCR仪通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合 B．凝胶中的DNA分子通过染色可以在红外灯下检测出来 C．DNA分子具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷 D．实验中使用的缓冲液及蒸馏水等使用前必须进行高压灭菌 【解析】 凝胶中DNA分子通过染色可以在紫外灯下检测出来，B错误；为了避免外源DNA等因素的污染，实验中使用的缓冲液及蒸馏水等使用前必须进行高压灭菌处理，D正确。 1 B 目标导学 1．教材P84～85“探究·实践”——实验步骤及注意事项 (1)按照PCR反应体系配方或PCR试剂盒的说明书，在微量离心管中依次加入各组分后，要进行______约10 s。目的：______________________________________ ___________________。 (2)预变性条件：________________，预变性目的：_______________________ ______________________________。 (3)为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行__________________处理。 目标二　实验步骤、结果分析