内容正文:
第3章 基因的本质
第三节 DNA的复制
授课人:
1
01
怎样证明DNA是半保留复制的?
02
DNA的复制过程是怎样的?
03
DNA的半保留复制对遗传信息的稳定传递有什么意义?
04
DNA的复制相关计算
F O C U S
本节聚焦
2
问题探讨
沃森和克里克 《核酸的分子结构》
科学研究需要大胆的想象,但是得出结论必须建立在确凿的证据之上。
碱基互补配对原则是指DNA两条链的碱基之间有准确的一一对应关系,暗示DNA的复制可能需要先解开DNA双螺旋的两条链,然后通过碱基互补配对合成互补链。
1、复制机制可能是怎样的?
2、为什么用“可能”?
值得注意的是,我们提出的这种碱基特异性配对方式,暗示着遗传物质进行复制的一种可能机制。
3
DNA结构对遗传的影响
①DNA复制时,DNA双螺旋解开,互补的碱基之间的氢键断裂;
5’
3’
5’
3’
3’
5’
5’
3’
双螺旋解开
氢键断裂
①DNA复制时,DNA双螺旋解开,互补的碱基之间的氢键断裂;
一、对DNA复制的推测
做出假说
4
②解开的两条单链分别作为复制的模板,游离的脱氧核苷酸依据碱基互补配对原则,通过形成氢键,结合到作为模板的单链上;
3’
5’
5’
3’
模板
模板
子链
子链
一、对DNA复制的推测
做出假说
5
③新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的一条链,这种复制方式被称做半保留复制。
3’
5’
5’
3’
模板
模板
子链
子链
原来的
原来的
新的
新的
一、对DNA复制的推测
做出假说
6
5’
3’
5’
3’
5’
3’
3’
5’
3’
5’
5’
3’
半保留复制
+
应该是
全保留复制
一、对DNA复制的推测
做出假说
7
5’
3’
5’
3’
5’
3’
3’
5’
3’
5’
5’
3’
半保留复制
+
5’
3’
5’
3’
全保留复制
5’
3’
5’
3’
+
5’
3’
5’
3’
都是新链
哪种假说正确?
一、对DNA复制的推测
做出假说
8
5’
3’
5’
3’
5’
3’
3’
5’
3’
5’
5’
3’
分散复制
+
应该是
分散复制
补充:
一、对DNA复制的推测
做出假说
9
思考:
1、我们这里用什么区分原来链和新链?
颜色
2、真实DNA有没有颜色?有没有其他方法把他们区分?
没有
放射性同位素标记法
3、放射性同位素有哪些记得吗?
放射性同位素: 14C 、32P 、3H 、35S
一、对DNA复制的推测
实验思路分析
10
思考:
4、怎么标记上放射性呢?
比如我们可以把原链中的C标记上放射性,子链中没有
5、放射性同位素标记法能区分开吗?
不能,这种方法只能检查到整体有还是没有放射性,不能区分每一条链有无放射性
有放射性
有放射性
一、对DNA复制的推测
实验思路分析
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思考:
6、除了放射性外,原链和新链还有什么不同?
原链上的C都为14C,新链中的C都为12C,相对分子质量不同,一条重,一条轻。
7、既然我们不需要放射性,用哪种同位素更好?
稳定同位素
有放射性
有放射性
14C
12C
14C
12C
14C
14C
12C
12C
稳定同位素: 15N 、18O
一、对DNA复制的推测
实验思路分析
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思考:
8、这些DNA密度有什么区别?
9、有什么方法可以把他们区分开吗?
密度梯度离心
15N
14N
15N
14N
14N
14N
15N
15N
密度最大
密度居中
密度居中
密度最小
一、对DNA复制的推测
实验思路分析
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一、对DNA复制的推测
演绎推理——预测实验结果
对照组
(14N/14N) 亲代G0
(15N/15N) 第一代G1 第二代G2
全保留复制 DNA标记类型
离心后试管中的位置
轻带
重带
1/2
1/2
1/4
3/4
中带
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一、对DNA复制的推测
演绎推理——预测实验结果
对照组
(14N/14N) 亲代G0
(15N/15N) 第一代G1 第二代G2
半保留复制 DNA标记类型
离心后试管中的位置
轻带
重带
1/2
1/2
中带
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对照组
(14N/14N) 亲代G0
(15N/15N) 第一代G1 第二代G2
分散复制 DNA标记类型
离心后试管中的位置
一、对DNA复制的推测
演绎推理——预测实验结果
轻带
重带
中带
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通过超离心机对某一介质(氯化铯等) 长时间加一个离心力,使其在离心管 内从液面到底部出现一定的密度梯度。
密度梯度离心
二、DNA半保留复制的实验证据
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二、DNA半保留复制的实验证据
密度梯度离心模拟实验
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梅塞尔森
斯塔尔
1958年
大肠杆菌
同位素标记技术
二、DNA半保留复制的实验证据
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二、DNA半保留复制的实验