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专题12 基因工程
1.(2023·山东济南·统考一模)采用CTAB法可获得高纯度的DNA,CTAB是阳离子去污剂,可溶解细胞膜,与核酸形成复合物,溶于乙醇。具体步骤∶将植物叶片研磨成粉末,加入CTAB提取液(含CTAB、2mol/LNaCl),离心后,取上清液;上清液中加入氯仿、异戊醇混合液,充分混匀,离心取上清液,加入异丙醇于-20℃沉淀,再用RNA酶、95%的乙醇沉淀DNA;自然干燥后,加缓冲液溶解DNA后备用。下列说法错误的是( )
A.CTAB-核酸复合物溶于高盐溶液中,可通过加乙醇使核酸沉淀并去除CTAB
B.推测氯仿和异戊醇抽提可除去蛋白质、多糖等杂质,异丙醇或乙醇可将DNA沉淀分离
C.CTAB可通过加速解聚核蛋白用于提取叶绿体DNA和质粒DNA
D.提取的DNA可在一定温度下利用二苯胺溶液鉴定
2.(2023·山东聊城·统考一模)下列关于DNA的提取和DNA片段的扩增及电泳鉴定的叙述,正确的是( )
A.利用DNA和蛋白质在冷酒精中溶解性的差异可将DNA进一步纯化分离
B.在提取白色丝状物时双向搅拌比单向搅拌更有利于获得结构完整的DNA
C.PCR实验中使用的微量离心管、枪头、蒸馏水和移液器等在使用前都必须进行高压蒸气灭菌处理
D.PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定,电泳时电泳缓冲液不能没过凝胶
3.(2023·山东青岛·统考一模)原位PCR技术是利用原位PCR仪,在组织或细胞中靶DNA所在的位置上进行的PCR循环扩增,通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。进行扩增时,反应体系中的反应成分需渗透到组织或细胞的靶DNA处才能进行扩增。PCR反应体系中需要添加一定浓度的Mg2+,而组织细胞间的物质会吸附Mg2+,使进入细胞的Mg2+减少。下列说法正确的是( )
A.原位PCR技术可用于人类β-地中海贫血致病基因的检测
B.原位PCR反应体系中使用的Mg2+浓度要比常规PCR低
C.反应体系中引物的G、C碱基含量越高,其结合的特异性越强
D.反应体系中NTP作为扩增的原料,会依次连接到子链的5'端
4.(2023·山东济宁·统考一模)PH基因两侧限制酶MspI酶切位点的分布存在两种形式,如图1,其中异常的PH基因可导致苯丙酮尿症。图2是某患者的家族系谱图,为确定④号个体是否患苯丙酮尿症,提取该家庭成员的相关DNA经MspI酶切后电泳,分离得到DNA条带分布情况如图3,酶切有时会出现不完全的情况,分子量较小的条带因电泳速度过快导致难以观察。下列叙述正确的是( )
A.①号个体23Kb的DNA条带中含有异常PH基因
B.②号个体19Kb的DNA条带中含有正常PH基因
C.④号个体携带异常PH基因的概率为1/2
D.④号个体肯定不是苯丙酮尿症患者
5.(2023·山东烟台·统考一模)我国科研人员将番木瓜环斑病毒(PRSV,一种单链RNA病毒)的复制酶基因转入番木瓜,培育出抗病毒番木瓜“华农一号”。“华农一号”能产生与PRSV的RNA形成局部双链的RNA,阻止病毒的复制。下列分析错误的是( )
A.培育抗病毒番木瓜"华农一号"需要用到植物组织培养技术
B.培育“华农一号”时,可以用不同的限制酶切割质粒和目的基因
C.PCR扩增复制酶基因时,反应体系中需加入逆转录酶和Taq DNA 聚合酶
D.“华农一号”通过表达出复制酶使番木瓜获得对PRSV病毒的抗性
6.(2023·山东济南·统考一模)为了构建重组DNA疫苗,可将不同的抗原DNA片段进行重组,图中A、B载体有三个酶切位点,其中Bcl Ⅰ和BamH Ⅰ识别并切割的核苷酸序列相同,如图所示。现对A载体和B载体分别进行双酶切得到含A载体片段和含B载体片段,经DNA连接酶得到BA载体,需要使用的酶分别是( )
选项
A载体
B载体
A
①+②
①+③
B
①+③
①+②
C
①+③
①+③
D
①+②
①+②
A.A B.B C.C D.D
7.(2023·山东临沂·统考一模)新冠疫情的快速控制,离不开我国政府的科学决策和对新冠病毒(一种RNA病毒)的快速检测能力。荧光定量PCR可定量检测样本中DNA含量,其原理是在PCR反应体系中加入引物的同时,加入与某条模板链互补的荧光探针,当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处会水解探针并生成荧光分子,即DNA每扩增一次,就有一个荧光分子生成(如图),荧光监测系统随时接收荧光信号变化。每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环次数称为循环阈值(Ct值)。下列说法正确的是( )
A.细胞内DNA复制的引物种类与PCR所用引物种类相同
B.一个初始DNA分子经过4次循环后,得到6个等长的DNA分子
C.Ct值越大,被检测样本中病毒数目越多,对被检