2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体-【高效课堂】2022-2023学年高二生物同步精讲课件（人教版2019选择性必修3）

二、动物细胞融合技术与单克隆抗体 本节聚焦: 什么是动物细胞融合技术？ 单克隆抗体是如何制备的？在临床上有哪些应用？ 第2.2节 动物细胞工程 1.你从视频中了解到单克隆抗体具有哪些特点？ 2.分析“单克隆抗体”一词中“单”和“克隆”的含义。 单克隆抗体：由单一细胞产生的只能识别一种抗原的特异性抗体。 能产生抗体且增殖能力强的细胞？ 【思考】 （1）什么细胞能产生抗体？ （2）能产生抗体的细胞能否大量增殖？ （3）什么细胞具有无限增殖的能力？ （4）能否培养出一种能分泌抗体且增殖能力强的细胞？ 浆细胞 浆细胞没有增殖能力 肿瘤细胞 动物细胞融合技术 动物细胞融合技术 一 阅读教材P48，回答下列问题： 1. 什么是动物细胞融合技术（概念）？原理是什么？ 2. 所形成的杂种细胞有什么特点？ 3. 诱导动物细胞融合的方法有哪些？ 4. 灭活病毒诱导动物细胞融合的原理？（相关信息） 5.动物细胞融合技术的意义和应用有哪些？ 性味功效：味甘，性微寒。 生津养胃；滋阴清热；润肺益肾；明目强腰。 药理作用 生津作用：铁皮石斛石斛具有生津作用，主要表现为促进腺体分泌和脏器运动。 降血糖作用：铁皮石斛对可降低链脲霉素诱发糖尿血糖值。 [13-14] 增强机体免疫力：铁皮石斛颗粒（TPSH）可促进荷瘤动物巨噬细胞的吞噬功能，增强T淋巴细胞的增殖和分化及NK细胞的活性，并能明显提高荷瘤动物的血清溶血素值，提示TPSH无论是对非特异性免疫功能，或是特异性细胞免疫以及体液免疫功能，均有一定的提高作用。 [12] [15] 5 A细胞 B细胞 纤维素酶 果胶酶 1.去壁： 酶解法 正在融合的原生质体 再生出细胞壁 2.诱融 物理法： 化学法： 电融合法、离心法 聚乙二醇（PEG）融合法、 高Ca2+ —高PH融合法等 脱分化 再分化 移栽 杂种植株 愈伤组织 A原生质体 B原生质体 移栽后的植株 植物体细胞杂交技术过程 植物体细胞杂交技术 植物组织培养 原生质体融合 （植物细胞的全能性） （细胞膜的流动性） 1.概念： 2.原理： 3.融合方法： 4.意义： 使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。 细胞膜的流动性 PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。 （化学法、 物理法、 生物法 ） 突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。 动物细胞融合特有 杂交细胞：具有原来两个或多个细胞的遗传信息 动物细胞融合技术 一 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力， 但并不破坏它们的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理是： 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生 作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 动物细胞融合实质及完成的标志：细胞核的融合 相关信息 单克隆抗体的制备过程 二 任务：尝试建构制备新冠病毒单克隆抗体的流程 问题1：如何获得能产生新冠病毒抗体的B淋巴细胞？ 注射特定抗原（新冠病毒） 问题2：如何诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合？ 注射特定的抗原 培养骨髓瘤细胞 聚乙二醇（PEG）融合法、电融合法、灭活病毒诱导法 问题3：初始的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均有多个，融合后得到的细胞是否都是杂交瘤细胞？ 未融合的细胞； B淋巴细胞与B淋巴细胞融合； 骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合； 杂交瘤细胞 单克隆抗体的制备过程 二 任务：尝试建构制备新冠病毒单克隆抗体的流程 问题4：如何筛选出杂交瘤细胞？ 骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合 杂交瘤细胞 选择培养基 第一次筛选： 方法：用选择培养基筛选出杂交瘤细胞 原理：选择培养基只允许杂交瘤细胞生长、增殖，未融合的亲本细胞和融合了同种核的细胞不能生存 问题5：筛选出来的杂交瘤细胞有什么特点？ 既能迅速大量增殖，又能产生抗体 单克隆抗体的制备过程 二 任务：尝试建构制备新冠病毒单克隆抗体的流程 问题6：小鼠在生活中还会受到其他抗原的刺激，杂交瘤细胞是否都能分泌新冠病毒抗体？ 问题7：如何筛选出能分泌新冠病毒抗体的杂交瘤细胞？ 第一次筛选获得的杂交瘤细胞中存在产生其他抗体的细胞 第二次筛选： 方法：克隆化培养、抗体检测 原理：抗原-抗体杂交 阳性孔 多孔细胞培养板 单克隆抗体的制备过程 二 任务：尝试建构制备新冠病毒单克隆抗体的流程 问题8：经筛选后得到的杂交瘤细胞的数量有限，怎样获得大量的单克隆抗体？ 体内培养：注入小鼠腹腔内增殖 体外培养：细胞培养液 问题9：体外培养的条件是什么？ 营养条件；温度、PH、渗透压条件；无菌、无毒的环境；气体环境 问题10：单克隆抗体制备过程中用到的技术手段有哪些？原理是什么？ 动物细胞培养、动物细胞融合技术 原理：细胞增殖、细胞膜的流动性 应用到的技术