2.2.1动物细胞培养 课件 2022—2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3

第2节 动物细胞工程 （动物细胞培养） 讲课人：涂梦婷 第二章 细胞工程 动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 动物细胞核移植等 最基本 克隆皮肤 克隆猴： 中中和华华 单克隆抗体 动物细胞工程 动物细胞培养 1、概念： 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 取组织 → 分散 → 生长增殖 2、原理： 细胞增殖（有丝分裂） 3、目的： 获得细胞或者细胞产物（不能获得完整动物个体 ） 动物细胞核具有全能性 3 动物细胞培养的条件 动物细胞培养的 条件 营养物质 稳定的 内环境 < < 糖类 氨基酸 无机盐 维生素 无菌、无毒的环境 温度 适宜的气体环境 适宜的理化性质 渗透压 pH …… 在讲解动物细胞培养的过程之前，我们要先明白，什么样的环境能维持动物细胞的正常生命活动，并使细胞不断增殖，所以来看到动物细胞培养的条件 4 动物细胞培养的条件 营养 葡萄糖 氨基酸 无机盐 维生素 … … 【思考】培养基的类型： 固体培养基　or　液体培养基 合成培养基 or 天然培养基 培养液 动物细胞培养的条件 营养 葡萄糖 氨基酸 无机盐 维生素 … … 不能以淀粉、蔗糖等为碳源 合成培养基：将细胞所需的营养物质按种类和所需 量严格配制而成。 血清 由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚。血清可以补充合成培养基中缺乏的物质，如营养物质、多种未知的促细胞生长因子及其他活性物质等。 动物细胞培养的条件 保证无菌、无毒的环境 无菌 ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理 ②在无菌环境下进行操作 定期更换培养液。 无毒 ③添加一定量的抗生素 目的：方便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害。 动物细胞培养的条件 温度、PH和渗透压 (1)适宜的温度：哺乳动物多以__________ ℃为宜。 (2)适宜的pH：多数细胞生存的适宜pH为_________。 (3)适宜的渗透压。 36.5±0.5 7.2～7.4 温度：37℃ pH：7.35-7.45 渗透压：770KPa 内环境 目的： 维持细胞正常的形态和功能 动物细胞培养的条件 气体环境 （1）气体的组成及作用 O2： CO2： 细胞代谢所必需 维持培养液的pH （2）容器： 通常采用培养皿或松盖培养瓶。 （3）仪器： 置于含有95%空气和5%CO2的混合气体 的CO2培养箱中进行培养。 动物细胞培养的条件 动物细胞培养的 条件 营养物质 稳定的 内环境 < < 糖类 氨基酸 无机盐 维生素 无菌、无毒的环境 温度 适宜的气体环境 适宜的理化性质 渗透压 pH …… 动物细胞培养的过程 概念： 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 取动物组织 → 分散成单个细胞 → 生长增殖 （1）取材: 一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。 （2）取材原因: 细胞分化程度低，分裂能力强，容易培养 动物细胞培养的过程 取动物组织 → 制成细胞悬液 → 生长增殖 （1）将组织分散成单个细胞 ①方法 机械法 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间 （2）用培养液将细胞制成细胞悬液。 思考：用胰蛋白酶分散细胞，说明动物细胞间的物质主要是什么成分？ 蛋白质 动物细胞培养的过程 取动物组织 → 制成细胞悬液 → 生长增殖 （1）将组织分散成单个细胞 ①方法 机械法 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间 （2）用培养液将细胞制成细胞悬液。 思考：可以用胃蛋白酶处理吗？为什么？ 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白晦就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。 动物细胞培养的过程 取动物组织 → 制成细胞悬液 → 生长增殖 （1）将组织分散成单个细胞 ①方法 机械法 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间 （2）用培养液将细胞制成细胞悬液。 思考：胰蛋白酶处理时间过长，会怎样？ 会分解细胞膜蛋白，破坏细胞结构，对细胞造成损伤 动物细胞培养的过程 取动物组织 → 制成细胞悬液 → 生长增殖 （1）将组织分散成单个细胞 ①方法 机械法 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间 ②原因 Ⅰ.从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起， 彼此限制了生长和增殖； Ⅱ.能使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。 （2）用培养液将细胞制成细胞悬液。 取动物组织 → 制成细胞悬液 → 原代培养 → 分瓶 → 传代培养 动物细胞培养的过程 用培养液将细胞制成细胞悬