内容正文:
第3节 DNA的复制
沃森和克里克在发表DNA双螺旋结构的那篇著作短文的结尾处写道:“值得注意的是,我们提出的这种碱基特异性配对方式,暗示着遗传物质进行复制的一种可能的机制”
碱基互补配对原则暗示DNA的复制机制可能是怎样的?
一、对DNA复制的推测
①半保留复制
②全保留复制
形成的两个DNA分子各有一条链来自亲代,另一条链是新形成的
新复制出的两个DNA分子,一个是亲代的,另一个是新形成的
③弥散复制
新复制出的两个DNA分子每条链中既有母链片段又有新形成的片段
1.提出问题:
DNA的复制方式是三种方式中的哪一种?
2.作出假设:
如何在实验中直观区分母链和子链及子代DNA呢?
同位素示踪技术
大肠杆菌 同位素(15N)示踪(繁殖快,20min一代)
形成的不同密度的DNA分子应如何区分?
密度梯度离心
利用离心技术可以在试管中区分含有不同N元素的DNA;
科学家梅塞尔森和斯塔尔的实验思路:
把复制的单链和原来的链做上标记,观察它们在新DNA中出现的情况。
(2)通过离心处理,完全含15N的DNA密度最大,位于离心管的最下端,称为重带;完全含14N的DNA密度最小,位于离心管的最上端,称为轻带;既含15N又含14N的DNA密度居中,构成中带。
(1)培养15N标记的细菌,放置在以14N为唯一氮源的培养基中连续培养,已知细菌20min分裂一次,分别在20min、40min、...取样,然后破碎细胞,分离出DNA,就可准确地获得各代的DNA。
3.演绎推理:
按照梅塞尔森和斯塔尔的实验思路,画一画按三种复制方式得到的DNA标记情况。
细胞分裂一次
15N/14N-DNA
提取DNA离心
15N/15N-DNA
14N/14N-DNA
15N/14N-DNA
转移到含14NH4CI中
密度
低
高
提取DNA离心
提取DNA离心
第一代
第二代
15N/15N-DNA
15N/14N-DNA
14N
14N
14N
如果DNA复制为半保留复制
第一代会出现的结果是
第二代会出现的结果是
15N/14N-DNA
15N/14N-DNA
14N/14N-DNA
细胞分裂一次
提取DNA离心
15N/15N-DNA
14N/14N-DNA
15N/15N-DNA
转移到含14NH4CI中
密度
低
高
提取DNA离心
提取DNA离心
第一代
第二代
15N/15N-DNA
14N
14N
14N
14N/14N-DNA
如果DNA复制为全保留复制
第一代会出现的结果是
第二代会出现的结果是
14N/14N-DNA
15N/15N-DNA
15N/15N-DNA
15N/15N-DNA
14N/14N-DNA
如果DNA复制为弥散复制
第一代会出现的结果是
第二代会出现的结果是
第一代
第二代
DNA的复制方式为半保留复制
4.实验验证:
5.得出结论:
假说-演绎法
思考
分子总数________
只含15N的分子___________
含15N 14N的分子__________
只含14N的分子___________
含14N的分子___________
脱氧核苷酸链总数________
含15N的链为_____________
含14N的链为_____________
2n
0
2
2n-2
2n+1
2
2n+1-2
2n
已知一条全部N原子被15N标记的DNA分子(亲代),转移到含14N的培养基上培养n代,其结果如下,回答下列问题
:解旋酶催化
解旋
模板
(在DNA聚合酶的催化下,利用游离的脱氧核苷酸进行)
复制
:以母链为模板进行碱基配对
母链
子链
:组成
复制后的DNA
同时进行
二、复制的过程
以亲代DNA分子为模板合成子代DNA的过程。
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1.DNA复制的场所和时期
场所:
时期:
2.DNA复制的必需的条件
模板:
原料:
能量:
酶:
3.DNA复制的方式和特点
方式:
特点:
细胞核(主要)、线粒体和叶绿体
有丝分裂和减数第一次分裂前的间期
DNA两条链为模板
4种游离的脱氧核苷酸
ATP
解旋酶和DNA聚合酶等
半保留复制
半保留复制
边解旋边复制
4.DNA复制的结果
形成2条DNA
5.DNA复制的意义
(1)将遗传信息从亲代传递给了子代,保持了遗传信息的连续性
(2)复制出现差错,产生的影响可能很大,也可能没有
例:DNA复制有约10-9的错误率,约为31.6亿个碱基对的人类基
因组复制时可能产生6.32个碱基的错误。
6.DNA能够准确复制的原因:
(1)DNA独特的双螺旋结构提供精确模板
(2)通过碱基互补配对原则保证了复制的准确进行
1、双链DNA中,含某种碱基a个,复制n次,则需加入该碱基或脱氧核苷酸 。