内容正文:
自然界中微生物数量繁多,种类庞杂,要想从中分离出需要的特定微生物并不容易,尤其当要分离的微生物在混合的菌群中不是优势种群时,仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。该怎么办呢?
第1章 第2节
人教版 选择性必修3
3
目录
CONTENTS
微生物的选择培养和计数
2/
选择培养基
1/
1973年,科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌
水生栖热菌
耐高温的DNA聚合酶
耐高温的DNA聚合酶
耐高温的DNA聚合酶
这种酶目前已被广泛用于体外扩增DNA片段的聚合酶链式反应(PCR)
水生栖热菌
为什么水生栖热菌能从热泉中被筛选出来呢?
这是因为水生栖热菌能在 70~80 ℃的高温条件下生存,而绝大多数微生物在此条件下不能生存。
水生栖热菌
根据这个原理,我们能不能从许多微生物中筛选出我们需要的一种呢?
实验室中微生物的筛选,也可以应用同样的原理,即人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。
01
选择培养基
一
选择培养基
1.概念:
选择培养基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基。
2.原理:
原理:人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和PH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。
一
选择培养基
3.选择培养基四种常见制备方法或实例
加入某些特定的物质 原理 依据某些微生物对某些物质的抗 性,在培养基中加入某些物质,以“抑制”不需要的微生物的生长, “促进”所需要的微生物的生长(前提是培养基具备全部营养成分)
举例 加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
一
选择培养基
3.选择培养基四种常见制备方法或实例
改变培养基的营养成分 培养基缺乏氮源时 可分离自生固氮微生物,非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存
培养基缺乏有机碳源时 异养微生物无法生存,而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物而生存
一
选择培养基
3.选择培养基四种常见制备方法或实例
利用培养基“特定化学成分”分离 当石油为唯一碳源时 不能利用石油的微生物不能生存,能够利用石油的微生物能生存,从而分离出能降解石油的微生物
当尿素是唯一氮源时 不能利用尿素的微生物因缺乏氮源而不能正常生长,能够分解尿素的微生物能利用尿素作为氮源而正常生长
当以纤维素为唯一碳源时 能分解纤维素的微生物具有更多的生存机会而大量繁殖
一
选择培养基
3.选择培养基四种常见制备方法或实例
金黄色葡萄球菌
通过某些“特殊环境分离” 在高盐环境中 可分离耐盐微生物,其他微生物在— 盐浓度高时易失水而不能生存
在高温环境中 可分离得到耐高温的微生物,其他微生物在高温中因酶失活而无法生存
一
选择培养基
CO(NH2)2+H2O CO2+2NH3
脲酶
NO3-、NH4+
被植物吸收
一
选择培养基
设计一种选择培养基,用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来。
这种培养基与普通培养基相比,只是用尿素作为唯一氮源,培养基的其他营养成分基本相同。
1. 如果让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基的配方该如何设计?
2. 该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点?
一
选择培养基
选择培养基与鉴别培养基的比较
项目 选择培养基 鉴别培养基
原理
用途
举例
加入不影响甚至促进目标微生物生长,而抑制或阻止其他种类微生物生长的化学物质
加入某种指示剂或化学药品(不影响微生物正常生长),使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应
培养、分离出目标微生物
鉴别目标微生物
培养酵母菌和霉菌时,可在培养基中加入青霉素,抑制细菌的生长;利用以尿素为唯一氮源的培养基来培养可分解尿素的细菌
可用伊红美蓝培养基鉴定饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌(若有,则菌落呈黑色)
土壤中含有能分解尿素的细菌,还记得它们如何分解的吗?
CO(NH2)2+H2O CO2+2NH3
脲酶
我们如何分离它们?
每克土壤样品究竟含有多少这样的细菌?
NO3-、NH4+
被植物吸收
02
微生物的选择培养和计数
二
微生物的选择培养和计数
怎么分离?
如何计数?
二
微生物的选择培养和计数
分离的原理:
(一)实验原理
绝大多数微生物都能利用葡萄糖,但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基,可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。
计数的原理:
当样品的稀释度足够高时,通过统计平板上的菌落数,能推测出样品中的活菌数目。
选择培养基配方
二
微生物的选择培养和计数
分离