内容正文:
专题七 生物技术与工程
考点3 基因工程
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新题严选 洞察趋势
专题双练 分层突破
重要概念 优化检测
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为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因,同时避免内源HMA3基因的干扰,在进行PCR扩增时,应选择的引物组合是( )
A.①+③ B.①+②
C.③+② D.③+④
答案 B
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解析 PCR扩增时,由于子链延伸方向为5′端到3′端,因此应在模板DNA两条链的3′端分别设计一个引物,A错误;为了对重金属污染的土壤进行生物修复,研究者扩增获得的DNA片段只要既包含外源高效启动子序列又包含HMA3基因的序列,便可在检测是否有HMA3基因的同时,又可排除内源HMA3基因的干扰,若用③+②或③+④引物组合进行PCR扩增,扩增获得的HMA3基因不包含外源高效启动子序列,C、D错误;若用①+②或①+④引物组合进行PCR扩增,获得的DNA片段符合要求,B正确。
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A.转入的L-PG基因表达产物不能影响酿酒酵母活性
B.可以利用PCR技术筛选含有L-PG基因的受体细胞
C.通过同源重组实现酵母菌的PD基因被替换为L-PG基因
D.标记基因Amp′可检测是否成功构建乳酸乙酯高产菌株
答案 D
解析 酿酒酵母质粒上的PD基因替换为L-PG基因前后,标记基因Amp′均正常,故标记基因Amp′不能检测是否成功构建乳酸乙酯高产菌株。
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[例3] (不定项)下列关于生物工程中常见的叙述,正确的是( )
A.DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端的碱基黏合,形成重组DNA
B.限制性内切核酸酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗两个水分子
C.在进行基因工程操作中,天然质粒需经过人工改造后才能作为载体
D.利用酶解法处理植物细胞获得原生质体,便于进行植物杂交育种
答案 BC
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解析 DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端或平末端的磷酸二酯键黏合,形成重组DNA,A错误;限制性内切核酸酶将一个DNA分子片段切成两个片段,即断裂两个磷酸二酯键,因此需消耗两个水分子,B正确;在进行基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的,C正确;用酶处理植物细胞获得原生质体,便于植物细胞融合,属于植物体细胞杂交技术,植物杂交育种一般是通过杂交的方式获得所需的子代,D错误。
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回答下列问题:
(1)常用的DNA连接酶有E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶。上图中________________酶切割后的DNA片段可以用E.coli DNA连接酶连接。上图中______________________________酶切割后的DNA片段可以用T4 DNA连接酶连接。
EcoRⅠ、PstⅠ
EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ和EcoRⅤ
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解析 (1)限制酶EcoRⅠ和PstⅠ切割形成的是黏性末端,限制酶SmaⅠ和EcoRⅤ切割形成的是平末端,E.coli DNA连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来,而T4 DNA连接酶来源于T4噬菌体,可用于连接黏性末端和平末端,但连接效率较低。因此图中EcoRⅠ和PstⅠ切割后的DNA片段(黏性末端)可以用E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶连接,限制酶SmaⅠ和EcoRⅤ切割后的DNA片段(平末端)用T4 DNA连接酶连接。
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(2)DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是_____________。
(3)DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征,如质粒DNA分子上有复制原点,可以保证质粒在受体细胞中能________;质粒DNA分子上有____________________